[发明专利]一种从银杏叶提取物中制备山奈酚-3-O-芸香糖苷的方法

权利要求书

1.一种从银杏叶提取物中制备山奈酚-3-O-芸香糖苷的方法，其特征在于：以银杏叶提取物为原料，经甲醇-水溶液溶解后，得到银杏叶提取物溶液，再经过二维液相色谱分离纯化技术，得到山奈酚-3-O-芸香糖苷。

2.根据权利要求1所述的从银杏叶提取物中制备山奈酚-3-O-芸香糖苷的方法，其特征在于：所述银杏叶提取物溶于40-80%的甲醇-水溶液，制得银杏叶提取物溶液，银杏叶提取物浓度为10－1000mg/mL。

3.根据权利要求2所述的从银杏叶提取物中制备山奈酚-3-O-芸香糖苷的方法，其特征在于：所述银杏叶提取物最佳溶于50－60%的甲醇－水溶液，银杏叶提取物浓度最佳为250－550mg/mL。

4.根据权利要求1所述的从银杏叶提取物中制备山奈酚-3-O-芸香糖苷的方法，其特征在于：所述二维液相色谱分离纯化技术为二维液相色谱－质谱联用进行银杏叶提取物制备山奈酚-3-O-芸香糖苷；采用液相色谱进行一维制备的色谱柱为反相C18，二维制备的色谱柱为亲水型TECys色谱柱；

一维液相色谱制备采用的流动相为有机相和水相的混合，洗脱条件按照有机相15－65%等度或0－30分钟有机相由5%提高到60%梯度进行；其中有机相为甲醇或乙腈，水相为水；

对一维收集浓缩后的样品，进行二维液相色谱制备，二维液相色谱制备采用的流动相为有机相与水相混合，洗脱条件按照有机相70－90%等度或经0－20分钟有机相由95%降低到55%梯度进行，二维液相色谱制备根据质谱选择离子指导组分收集；其中有机相为甲醇或乙腈，水相为水；

将二维液相色谱制备收集到的山奈酚-3-O-芸香糖苷馏分进行旋转蒸发浓缩至干，得到山奈酚-3-O-芸香糖苷化合物。

5.根据权利要求4所述的从银杏叶提取物中制备山奈酚-3-O-芸香糖苷的方 法，其特征在于：所述对保留时间10－30分钟主成分为山奈酚-3-O-芸香糖苷的组分进行收集，旋转蒸发至干，作为一维制备山奈酚-3-O-芸香糖苷粗品。将一维制备山奈酚-3-O-芸香糖苷粗品用40%－80%的甲醇－水溶液溶解，至浓度为20－200mg/mL。

6.根据权利要求4所述的从银杏叶提取物中制备山奈酚-3-O-芸香糖苷的方法，其特征在于：所述制备时流动相流速为60－120mL/min，制备时柱温为室温或25－40℃，制备时进样量为200－3000μL/针，检测器为DAD紫外检测器和质谱检测器。

7.根据权利要求4所述的从银杏叶提取物中制备山奈酚-3-O-芸香糖苷的方法，其特征在于：所述一维制备最佳流动相为乙腈与水，采用梯度方式，乙腈比例由10%经15－20分钟增加到15%－25%。

8.根据权利要求7所述的从银杏叶提取物中制备山奈酚-3-O-芸香糖苷的方法，其特征在于：所述一维制备收集15－20分钟为主要含山奈酚-3-O-芸香糖苷的组分，一维制备山奈酚-3-O-芸香糖苷粗品用50%－60%的甲醇－水溶液制成浓度为60－100mg/mL的山奈酚-3-O-芸香糖苷粗品溶液。

9.根据权利要求8所述的从银杏叶提取物中制备山奈酚-3-O-芸香糖苷的方法，其特征在于：所述二维制备最佳流动相为乙腈（或含0.1%甲酸）与水（或含0.1%甲酸），采用等度条件，乙腈（或含0.1%甲酸）浓度为75－85%，二维制备质谱选择离子为m/z＝303和287，收集m/z=287的馏分。

10.根据权利要求8或9所述的从银杏叶提取物中制备山奈酚-3-O-芸香糖苷的方法，其特征在于：所述制备时流动相最佳流速为80－100mL/min，制备时柱温为室温，制备时进样量为2000－2500μL/针，紫外检测器为360nm。