[发明专利]一种具有促血管新生作用的中药提取物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于植物药用活性成分技术领域，涉及一种具有促血管新生作用的中药提取物及其制备方法和应用。

背景技术

血管新生是指在原有毛细血管基础上通过血管内皮细胞的增殖与迁移，从先前存在的血管处生成新的毛细血管的过程。血管新生在胚胎发育、创伤愈合、子宫内膜周期性增殖、肿瘤、增殖性视网膜病变等生理、病理状态中起着重要作用。调节机体血管新生的失衡过程，已成为某些疾病治疗的新策略。通过促进血管新生，可治疗许多存在血管新生不足性疾病，如冠心病、创伤和骨折延迟愈合、闭塞性脉管炎等。由于目前尚未有促进血管新生的有效治疗药物，因此从中药及经典复方中筛选提取是新药研究的重要途径。

发明内容

本发明解决的问题在于提供一种具有促血管新生作用的中药提取物及其制备方法和应用，是从中药经典名方当归补血汤中跟踪提取筛选得到有效部位，可应用于促血管形成和/或新生。

本发明是通过以下技术方案来实现：

一种具有促血管新生作用的中药提取物，该中药提取物的提取原料药为黄芪和当归，其提取是将黄芪和当归按质量比为5:1混合，经水提醇沉后回收乙醇所得的浓缩液上样于大孔吸附树脂，用水洗脱至流出液无色后再用体积浓度30～90%的乙醇溶液洗脱，收集洗脱馏分后回收乙醇，然后用有机溶剂萃取，再将有机溶剂萃取液回收溶剂后进行固定相层析分离，收集流动相洗脱所得馏分后干燥，得到当归补血汤有效部位。

所述中药提取物以黄芪甲苷、阿魏酸和毛蕊异黄酮苷的质量分数计，所含黄芪甲苷不少于5%、所含阿魏酸不少于2%、所含毛蕊异黄酮苷不少于2%。

一种具有促血管新生作用的中药提取物的制备方法，包括以下步骤：将黄芪和当归按质量比为5:1混合，经水提醇沉后回收乙醇所得的浓缩液上样于大孔吸附树脂，用水洗脱至流出液无色后再体积浓度30～90%的乙醇溶液洗脱，收集洗脱馏分后回收乙醇，然后用有机溶剂萃取，再将有机溶剂萃取液回收溶剂后进行固定相层析分离，收集流动相洗脱所得馏分后干燥，得到当归补血汤有效部位。

所述的具有促血管新生作用的中药提取物的制备方法，包括以下步骤：

1）将黄芪和当归按质量比为5:1分别粉碎后混合，用水浸泡后，煎煮提取或加热回流提取，提取完成后收集提取液，减压浓缩得到浓缩液；浓缩液加乙醇至含醇体积浓度达10～95%，搅拌均匀后常温或冷藏条件下静置，待沉淀完全后过滤得上清液，上清液回收乙醇至无味，得到醇沉液；

2）将醇沉液回收乙醇所得的浓缩液上样于大孔吸附树脂，先用水洗脱至流出液无色，然后再用体积浓度30～90%的乙醇溶液洗脱，收集洗脱馏分，回收洗脱馏分中的乙醇，得到二次浓缩液；

3）将二次浓缩液加水充分搅拌后加入有机溶剂萃取，分离有机相提取液并浓缩回收溶剂，得到三次浓缩液；

4）三次浓缩液进行固定相层析分离，固定相为非极性固定相或三氧化二铝，流动相为水和与水互溶的有机溶剂的混合液，三次浓缩液上样于固定相后经流动相洗脱，收集洗脱馏分，真空或常温干燥后得到粉状的具有促血管新生作用的中药提取物。

所述的将黄芪和当归粉碎混合后，用其质量5～10倍的水浸泡1～5h后，煎煮提取1.5～5h或加热回流提取1～5h，提取完成后收集提取液，减压浓缩得到浓缩液；

所述的大孔吸附树脂为D-101、HPD722、AB-8、DA-201、DS401、DM-301、HPD-100、DM130或H-103，用水洗至无色后再用体积浓度为30～90%的乙醇溶液洗脱，洗脱的流速为1.0～2.0ml/min，收集醇洗脱液；

所述的萃取的有机溶剂为乙酸乙酯、氯仿或正丁醇；

所述的非极性固定相为C18、C8或大孔硅胶等，所述的与水互溶的有机溶剂为甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮或四氢呋喃，与水互溶的有机溶剂的加入以调节在固定相中的保留时间；固定相层析分离流动相的流速为1.0～100ml/min。

所述的浓缩液或二次浓缩液的相对密度为1.06～1.10g/ml，第三次浓缩液的相对密度为0.90～0.95g/ml；

所述的水与水互溶的有机溶剂的体积比为85:15～20:80。

所述的具有促血管新生作用的中药提取物在制备促血管形成和/或新生药物中的应用；

或者在制备改善血管新生不足或低下的药物的应用；

或者在制备调整机体或组织的血管新生及状态的药物的应用。

所述的药物包括：

抗心肌缺血、抗脑组织缺血、抗外周组织缺血的药物；