[发明专利]一种大样本快速三维显微成像的方法和系统有效
申请号: | 201210402820.4 | 申请日: | 2012-10-19 |
公开(公告)号: | CN102928970A | 公开(公告)日: | 2013-02-13 |
发明(设计)人: | 骆清铭;龚辉;许冬力;李安安 | 申请(专利权)人: | 华中科技大学 |
主分类号: | G02B21/00 | 分类号: | G02B21/00;G02B21/06;G02B21/36 |
代理公司: | 武汉开元知识产权代理有限公司 42104 | 代理人: | 唐正玉 |
地址: | 430074 湖北*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 样本 快速 三维 显微 成像 方法 系统 | ||
1.一种大样本快速三维显微成像的方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)样本包埋在样本块中,固定在精密三维电动平移台之上;
(2)数字微镜阵列工作在二值调制的模式下,对照明光进行二值调制,形成结构光条纹,结构光显微镜采集样本表层1-100微米深度内的图像;
(3)完成成像区域内表层的成像后,利用金刚石或硬质合金刀具,去除样本块表层已成像部分;
(4)重复步骤(2)和步骤(3),直到完成数据获取任务。
2.根据权利要求1所述的大样本快速三维显微成像的方法,其特征在于所述步骤(2)具体方法为:
(a)数字微镜阵列工作在二值调制的模式下:指当面阵相机进行曝光时,数字微镜阵列中的每个微型反射镜都工作在稳定状态下,不进行任何翻转,出射光在物镜焦面只有亮和暗两种状态,分别对应微型反射镜固定在入射光出射和非出射两种角度的状态,不存在灰度的变化;
(b)当曝光完成后,数字微镜阵列中的微镜进行翻转,改变至下一相位图案,同时触发面阵相机进行再次曝光,重复该过程直到完成结构光成像所需的0、2/3pi和4/3pi三幅不同相位图像的采集;
(c)步骤(b)完成后,数字微镜阵列中的微镜统一翻转至入射光非出射的角度上,阻挡照明光照射到样本上;
(d)压电位移器带动物镜进行轴向移动,使物镜焦面对准同一个成像子区域的更深层样本进行成像;
(e)采集得到的图像存储在计算机硬盘或者内存中,利用公式 获得层析图像,S表示层析图像,I表示面值相机获取的三幅原始图像,其下标表示三幅原始图像的相位。
3.一种大样本快速三维显微成像系统,包括:光源、光导、一块激发滤光片、一块发射滤光片、三块透镜、数字微镜阵列、二块反射镜、一块二向色镜、压电位移器、物镜、精密三维电动平移台、面阵相机、数字微镜阵列驱动板、压电位移驱动器、平台控制器、图像采集卡、计算机、金刚石或硬质合金刀具,其特征在于:计算机分别与数字微镜阵列驱动板、压电位移驱动器、平台控制器、图像采集卡相连,数字微镜阵列与数字微镜阵列驱动板相连,压电位移器与压电位移驱动器相连,精密三维电动平移台与平台控制器相连,面阵相机与图像采集卡相连,面阵相机受数字微 镜阵列驱动板输出的触发脉冲信号控制采集时刻;由光源出射的光耦合入光导中,均匀化后经由激发滤光片、第一透镜进行准直,第一反射镜将光束反射至数字微镜阵列中,当数字微镜阵列中的微镜处于12?状态时,被微镜反射的光线经由第二反射镜被第二透镜收集,经过二向色镜反射后进入固定在压电位移器上的物镜中;样本固定在精密三维电动平移台之上,样本接受激发光后发出的光经物镜、二向色镜,第三透镜和发射滤光片,最后在面阵相机上成像;金刚石或硬质合金刀具固定在钢制刀架上。
4.根据权利要求3所述的大样本快速三维显微成像系统,其特征在于:所述的光源为LED、卤素灯或汞灯。
5.根据权利要求3所述的大样本快速三维显微成像系统,其特征在于:所述的光导为光纤或液态光导。
6.根据权利要求3所述的大样本快速三维显微成像系统,其特征在于:所述的面阵相机为电荷耦合元件CCD相机或互补金属氧化物半导体CMOS相机。
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