[发明专利]一种精确、快速和微量检测人血清中抗原和抗体的方法

权利要求书

1.一种精确、快速和微量检测人血清中抗原和抗体的方法，其特征是，采用微量(微升)检测板(30，60，72或其它孔微量(微升)检测板)应用红细胞凝集的方法去测定存在于人体体液的特异性抗原或抗体；

其中，所述方法可分别为：

以正向红细胞凝集的步骤检测红细胞膜上的抗原的方法；

以反向红细胞凝集的步骤检测人体内抗红细胞膜上的抗体的方法；

以间接血凝的步骤测定存在于人体体液的特异性抗体的方法；

以反向间接血凝的步骤测定存在于人体体液的特异性抗原的方法；

并且，所述方法中采用的微量(微升)板中的抗红细胞抗原抗体或吸附或交联抗体可以是多克隆抗体，也可以是单克隆抗体，还可以是液状抗体，还可以是干燥粉状抗体；所述方法中采用的微量(微升)板中的红细胞可以是新鲜红细胞，也可以是经醛化、鞣酸处理的冰冻红细胞，还可以是冷冻干燥红细胞粉剂，还可以是红细胞膜；

并且，在所述微量(微升)板中每个孔内加入微量(微升)已知单克隆或多克隆抗红细胞抗原的抗体，用于检测每个人的像A，B，O；Rh等抗原系统的红细胞抗原，而制备成各种系列型红细胞抗原检测盒的方法也称为正向红细胞凝集实验；

并且，在所述微量(微升)检测板预先放入孔内微量(微升)已知单克隆或多克隆抗红细胞抗原的抗体用于检测红细胞抗原，制备成各种系列型红细胞抗体检测盒，用于测定红细胞抗原，也称为反向红细胞配型；

并且，在所述微量(微升)板中每个孔内加入微量(微升)吸附或交联的已知单克隆或多克隆抗体，用于检测人的病毒，肿瘤，自体免疫性疾病等，制备成各种系列型抗原检测盒，这种方法也称为红细胞反向间接凝集实验；

并且，在微量(微升)版中每个孔内加入微量(微升)吸附或交联的已知的抗原，用于检测人的病毒，肿瘤，自体免疫性疾病等抗体，制备成各种系列型抗体检测盒，这种方法也称为红细胞间接凝集实验；

并且，采用所述30，60或72孔微量(微升)检测板检测红细胞膜表面抗原，用于检测每个人不止是像A，B，O；Rh等抗原系统的红细胞表型抗原(Phenotype)，而且还包括P，MNS，Kell，Luthern，Kell，Duffy和Kidd等红细胞系统，以及任何其它有关的红细胞系统，制备成用于检测每个人的红细胞表型抗原(Phenotype)抗原检测盒。

2.根据权利要求1所述的精确、快速和微量检测人血清中抗原和抗体方法，其特征是，所述用来检测人血清内的抗红细胞抗体或红细胞抗原系统所采用的方法可以是抗体和抗原直接的免疫反应所引起的红细胞凝集现象的直接反应；也可以是抗体和抗原在摄氏37度或摄氏4度孵育一定时间15或30分钟以后，洗去多余的抗体和抗原，加入像抗人免疫球蛋白这样的第二抗体，从而产生的间接的免疫反应的红细胞凝集现象的抗体或抗原的间接反应。

3.根据权利要求1所述的精确、快速和微量检测人血清中抗原和抗体方法，其特征是，所述的检测板可以是供临床或血库应用的反向红细胞检测板，其步骤是，在所述检测板中加入1微升新鲜红细胞、冷冻干燥红细胞粉剂或红细胞膜蛋白和5微升矿物油放于深低温冰箱存放，并以干冰保存运输给临床检验或血库应用；同理，所述的检测板可以供临床检验或血库应用的各种正向红细胞检测板、间接血凝板或反向血凝板，其步骤是，在所述检测板中加入1微升新鲜红细胞经醛化、鞣酸处理且吸附单克隆或多克隆抗体红细胞或冷冻干燥红细胞并与5微升矿物油放于深低温冰箱存放，并以干冰保存运输给临床检验或血库应用。

4.根据权利要求1所述的精确、快速和微量检测人血清中抗原和抗体方法，其特征是，所述方法中采用微量(微升)血量判断血型抗原或抗体，其步骤是，将检测者通过静脉或手指、耳垂的从末梢血管收集全血，经离心机后分离血清和红细胞，将红细胞用正常生理盐水稀释到1％到3％，取出1微升稀释的红细胞加入到微量(微升)检测板的孔中，以离心速度在300到1000rpm之间再离心30秒到1分钟，然后用吹风或摇晃打散离心后的红细胞，此后，用微量(微升)检测板直接用显微镜观察结果；根据红细胞凝集的程度，对凝集结果打分，从0加号到4个加号；0加号为没有红细胞凝集，为阴性反应，不存在相应的抗原；而4个加号为强阳性，存在相应的抗原。