[发明专利]一种使用吡嘧磺隆分子印迹聚合物分析磺酰脲类除草剂的方法与用途

权利要求书

1.一种使用吡嘧磺隆分子印迹聚合物分析磺酰脲类除草剂的方法，其特征在于该方法包括下述步骤： 

A、MISPE柱的制备 

称取150~250mg吡嘧磺隆分子印迹聚合物，装填到4~8ml固相萃取空柱中，得到吡嘧磺隆分子印迹固相萃取柱MISPE；所述的MISPE柱在使用前用2~10ml二氯甲烷、乙腈或它们的混合物进行活化处理； 

所述吡嘧磺隆分子印迹聚合物是采用下述合成方法得到的： 

（i）聚合反应步骤 

在聚合反应瓶中，按照α-甲基丙烯酸功能单体与吡嘧磺隆的摩尔比4:1~8：1，将α-甲基丙烯酸功能单体和模板分子吡嘧磺隆溶于二氯甲烷溶剂中，超声混合4~6min，于是得到一种二氯甲烷预聚合体系；然后，按照α-甲基丙烯酸功能单体、交联剂与引发剂的摩尔比4:4:1，往所述的二氯甲烷预聚合体系中加入三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯交联剂与偶氮二异丁腈引发剂，接着再进行超声混合脱气4~6min，最后充氮气除氧气4~6min，再在温度50~70℃的水浴中加热反应20~30h，得到一种高分子聚合物； 

（ii）模板分子洗脱步骤 

用力摇动步骤（i）使用的聚合反应瓶，得到具有一定粒径的高分子聚合物，然后在烘箱中温度为65~75℃的条件下进行干燥，再把聚合物装入索氏提取装置中加入洗脱剂洗脱所述模板分子，洗脱10~14h；然后，把洗脱的高分子聚合物进行干燥，再加入甲醇边搅拌边加热至温度65~75℃，直到无乙酸味放出，接着再加入丙酮洗去细小颗粒聚合物，最后移入烘箱中进行干燥，得到颗粒度D₅₀为9.15μm的吡嘧磺隆分子印迹聚合物； 

B、磺酰脲类除草剂标准物质贮备液的制备 

分别称量5mg吡嘧磺隆、苄嘧磺隆、甲磺隆、烟嘧磺隆和苯磺隆标准物质放于50mL容量瓶中，用乙腈充分溶解后并定容，于是配制得到 100μg/mL标准物质贮备液； 

C、磺酰脲类除草剂HPLC标准曲线的绘制 

分别移取一定量的在步骤B制备的标准物质贮备液于10mL容量瓶中，用乙腈稀释并定容，得到其浓度分别为1.00、5.00、10.00、15.00、20.00μg/mL标准物质的工作溶液，然后在下述条件下进行HPLC分析： 

色谱柱C18柱，250mm×4.6mm，填料直径5μm，使用流动相A与流动相B进行梯度洗脱，流动相A为含有0.01重量%磷酸的乙腈-水混合物，乙腈与水的体积比为20：80，流动相B为0.01重量%磷酸的乙腈-水混合物，乙腈与水的体积比为80：20；流速0.8mL/min；柱温30℃；检测波长241nm，进样量10μL； 

流动相在使用前用有机相0.45μm滤膜抽滤装置进行抽滤和超声波超声脱气20min；每个标准物质浓度重复进样3次，以液相色谱峰面积积分对其相应标准物质浓度作图，得到所述标准物质的HPLC标准曲线，由其相应标准曲线线性部分得到其相应的线性方程； 

D、净化样品溶液制备 

把待分析样品经预处理后溶于正己烷溶剂中得到一种样品溶液，把该样品溶液加到在步骤A准备的MISPE柱上，先进行淋洗，然后进行洗脱，收集洗脱液，合并洗脱液在N₂气下进行浓缩，除去有机溶剂，其残留物用0.5~1.5mL乙腈溶解，得到一种净化样品溶液； 

E、待分析样品的HPLC分析 

步骤D中得到的净化样品溶液在步骤C描述的条件下进行HPLC分析，根据步骤C得到的其线性方程，由其液相色谱峰面积积分代入相应的公式得到待分析样品的磺酰脲类除草剂含量。 

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的磺酰脲类除草剂是吡嘧磺隆、苄嘧磺隆、甲磺隆、苯磺隆和烟嘧磺隆。 

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于在制备吡嘧磺隆分子印迹聚合物的步骤（ii）中，洗脱模板分子的洗脱剂是甲醇、乙腈与乙酸按 照其体积比1.5~2.5:0.8~1.2:0.8~1.2混合的混合溶剂。 

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于在制备吡嘧磺隆分子印迹聚合物的步骤（ii）中，在洗脱模板分子的过程中每隔3~5h更换一次洗脱剂，洗脱温度控制在80-100℃。 

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于在制备吡嘧磺隆分子印迹聚合物的步骤（ii）中，洗脱的高分子聚合物在温度60~80℃的条件下干燥1~3h。