[发明专利]具有宽广pH活性纤维素酶及其制备方法无效
申请号: | 201210396001.3 | 申请日: | 2012-10-17 |
公开(公告)号: | CN102911952A | 公开(公告)日: | 2013-02-06 |
发明(设计)人: | 魏东芝;王玮;赵喜华 | 申请(专利权)人: | 华东理工大学 |
主分类号: | C12N15/56 | 分类号: | C12N15/56;C12N9/42;C12N15/63;C12R1/645 |
代理公司: | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人: | 杨元焱 |
地址: | 200237 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 具有 宽广 ph 活性 纤维素酶 及其 制备 方法 | ||
1.一种具有宽广pH活性纤维素酶基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述具有宽广pH活性纤维素酶基因,其特征在于:所述的纤维素酶基因编码的多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.一种根据权利要求1所述的纤维素酶基因的编码多肽,其特征在于:其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
4.根据权利要求3所述的编码多肽,其特征在于:所述的编码多肽在pH6-10条件下具有75%以上的纤维素酶相对活性,并且能在pH3-10保存下具有90%以上的残余相对活性。
5.一种具有宽广pH活性纤维素酶的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)由深海真菌Phaeosphaeria sp.LH21培养分离出具有宽广pH活性纤维素酶基因,该基因具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列;
2)将基因克隆到表达载体pPIC9K中;
3)将构建的表达载体转入到宿主细胞,生产具有宽广pH活性纤维素酶的基因工程菌;
4)培养基因工程菌,获得具有宽广pH活性纤维素酶。
6.根据权利要求5所述具有宽广pH活性纤维素酶的制备方法,其特征在于,所述宿主细胞为原核细胞或真核细胞,原核细胞包括大肠杆菌、枯草杆菌、链霉菌、或分支杆菌;真核细胞包括酵母细胞、里氏木霉、黑曲霉、米曲霉或各种动植物细胞。
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