[发明专利]一种鹅血红素提取方法

说明书

技术领域：

本发明属于血红素制备技术领域，具体涉及一种鹅血红素的提取方法。

背景技术：

血红素（分子式：C₃₄H₃₂N₄FeO₄)是血红蛋白、肌红蛋白、红细胞的辅基，是重要的天然卟啉铁化合物。动物机体中的铁大约70%以血红素的形式存在，其功能是血液输送氧气和二氧化碳的物质，它和蛋白质结合成血红蛋白，是一种生物铁，是人体缺铁性贫血的天然补血铁剂，很容易被吸收，对缺铁人群具有重要的保健功能。在畜禽肉类加工过程中会有大量血液产生，这些血液作为副产品目前多数被用作饲料、食用或被废弃，造成大量优质资源浪费甚至间接环境的污染。有资料报道，鹅血富含蛋白质、矿物质及抗癌因子等。然而，目前国内外对鹅血有效活性物质和功能缺乏深入研究，从鹅血中直接提取血红素技术还处于空白，市场上也没有鹅血红素产品，为此，对该产品的开发利用具有重要意义和市场发展前景。

发明内容

本发明的目的是提供一种鹅血红素的提取方法，即采用酶解法制备鹅血红素，以填补目前该方面的空白。

申请人通过长时间的研究，经过各种因素的筛选，确定出酶解法制备鹅血红素的最佳工艺条件。

本发明的鹅血红素制备方法，包括血球粉的制备和酶解处理步骤：

1）血球粉的制备：首先收集鹅血中的红细胞，再用NaCl溶液洗涤红细胞，然后将红细胞真空冷冻干燥完成血球粉的制备；

2）酶解处理：将制备的血球粉用水溶解后制成血球粉溶液，加入碱性蛋白酶和风味蛋白酶进行酶解，酶解液即为鹅血红素溶液。

上述步骤1）中NaCl溶液的质量体积百分比浓度为0.9%；真空冷冻干燥的条件为：-20℃～-45℃、20Pa～100Pa。

上述步骤2）中碱性蛋白酶和风味蛋白酶的质量比为1:1～3。

上述步骤2）中碱性蛋白酶和风味蛋白酶在酶解液中的加入量为3%~4%。

上述步骤2）中酶解温度为45℃~55℃，酶解时间为3.5h ~4.5h

血球粉的浓度为0.1~0.2g/mL。

上述步骤2）所得酶解液用截留分子量为1kDa~14kDa孔径的透析袋进行低温下透析即可得到鹅血红素含量更高的产品。

本发明采用了真空冷冻干燥法，避免了血球粉制备过程中与氧的接触，有效防止了在制备过程中血红素的损耗，避免了现有方法温度过高的缺点。离心后鹅血球制成血球粉后，克服血液本身易氧化变质的缺陷，有效防止了加工过程中血红素的损耗，其稳定性及方便性均得到一定提高，大大延长了产品的货架期，有利于保持血红素的活性。而采用酶解法提取血红素避免了传统有机溶剂法带来的化学污染，有利于鹅血红素在食品方面的进一步加工，填补了鹅血红素提取技术方面的空白，为鹅血红素生产工艺提供科学的参考。

附图说明

图1：本发明中单酶酶解温度与酶解时间交互作用响应面图；

图2：本发明中双酶酶解时间与酶用量交互作用响应面图。

具体实施方式

本发明采用酶解的方法制备鹅血红素微胶囊，分别以不同比例的碱性蛋白酶和风味蛋白酶为肽链内切酶和肽链外切酶。以酶解液中血红素含量为响应值，酶解时间、酶用量和酶总量比为响应因子，设计响应面试验，得到制备鹅血红素的最佳工艺条件。

本发明的制备方法，包括如下的步骤：

1）血球粉的制备: 首先收集鹅血中的红细胞，再用NaCl溶液洗涤红细胞，离心后将红细胞真空冷冻干燥完成血球粉的制备；

真空冷冻干燥处理中，样品于-40℃预冷，这是因为根据热力学中的相平衡理论，水的三相点(汽、液、固三相共存)温度为 0.0098℃，三相点压力为609.3pa(4.57mmHg)在水的相变过程中，当压力低于三相点压力时，固态冰可以直接转化为气态的水蒸气即冰晶升华。真空冷冻干燥即是把含有大量水的物质预先冷冻，使物质中的游离水结晶，冻结成固体，然后在高真空条件下使物质中的冰晶升华，待冰晶升华后再除去物质中部分吸附水，最终得到残余水量为1%~4%左右的干制品。在冷冻干燥前必须将物料进行彻底冷冻才能实现，如物料冷冻不完全，干燥处理中会出现大量泡沫，这会严重阻碍水分的升华。

2）酶解法提取鹅血红素：将制备的血球粉用水溶解后制成血球粉溶液，加入蛋白酶进行酶解，酶解液即为鹅血红素溶液；