[发明专利]高产纤维素酶活力的菌株及其筛选方法和使用方法

说明书

技术领域

本发明涉及酿酒领域，具体涉及一种高产纤维素酶活力的菌株，xqx-6，烟曲霉Aspergillus fumigatus保藏在中国典型培养物保藏中心（CCTCC），地址为武汉大学，邮编为430072，保藏号为CCTCC NO.M 2012231，及其筛选方法和使用方法。

背景技术

纤维素酶是一种复合酶，主要由外切β-葡聚糖酶、内切β-葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶等组成，它可将纤维素分解成多糖或单糖。纤维素酶在饲料、酒精、纺织和食品等领域具有巨大的市场潜力，已被国内外业内人士看好，将是继糖化酶、淀粉酶和蛋白酶之后的第四大工业酶种，因此纤维素酶是酶制剂工业中的一个新的增长点。

纤维素酶广泛存在于自然界的生物体中。细菌、真菌、放线菌、动物体内等都能产生纤维素酶。纤维素细菌的纤维素酶产量不高，主要是葡聚糖内切酶，而且大多数对结晶纤维素没有活性，所分泌的酶是胞内酶或吸附在细菌细胞壁上，很少能分泌到细胞外。纤维素放线菌的纤维素酶产量极低，研究很少。纤维素真菌产生的多为胞外酶，产酶效率高，而且纤维素酶的酶系结构较为合理，同时产生许多半纤维素酶、果胶酶和淀粉酶等，是降解纤维素原料的主要类群。其中比较典型的有木霉属(Trichoderma)、曲霉属（Aspergillus）和青霉属(Penicillium）。但产生纤维素酶的菌种多易退化，从而导致产酶能力降低。

目前工业生产纤维素酶有两种方法，液体发酵和固体发酵。液体发酵工艺控制简单，容易扩大规模。但其生产原料多为葡萄糖，对生产设备及环境等都要求很高，且废水处理量大，提高了生产成本。固态发酵法原料多采用纤维质原料，来源广泛，价格低廉，但其得到的是纤维素酶曲，后期萃取、浓缩较为困难。这就导致目前市场上见到的纤维素酶多为液体发酵得到的，价格相对较高。因此，解决固态发酵后期处理问题是目前纤维素酶菌种低廉、高效利用的关键。

中国白酒产量巨大，其废弃产物白酒丢糟每年可产生上千万吨。白酒丢糟主要含有纤维素，半纤维素和木质素三种组分，此外还含有少量淀粉，粗蛋白等。其中仅少量白酒丢糟被用来生产动物饲料或产沼气等，大部分白酒丢糟的利用已成为白酒厂亟待解决的问题。因此，利用白酒丢糟生产燃料酒精越来越受到大家的关注。但由于其自身结构原因，需对白酒丢糟进行预处理后才能用来发酵产生酒精。采用化学处理方法一般都需要在高温高压下，不仅生产成本高，而且过程繁琐，不易操作，用生物方法可以很好的解决这一问题，但纤维素酶价格却较贵。

发明内容

本发明提供一种高产纤维素酶活力的菌株及其筛选方法和使用方法，能够提高白酒丢糟的发酵率。

本发明提供了一种高产纤维素酶活力的菌株，xqx-6，烟曲霉Aspergillus fumigatus保藏在中国典型培养物保藏中心（CCTCC），保藏号为CCTCC NO.M2012231。

本发明还提供了一种上述的高产纤维素酶活力的菌株的筛选方法，包括如下步骤：

A.通过纤维素无机盐液体培养基富集培育菌；

B.将步骤A富集培育的菌在浸有无机盐培养基的滤纸上进行一次或多次接种；

C.获取所述滤纸断裂处的培养物并将其在羧甲基纤维素培养基平板上进行一次或多次划线分离，得到纯菌株；

D.将步骤C得到的所述纯菌株在无机盐培养基中进行培养并进行纤维素分解；

E.将步骤D中纤维素分解能力强的所述纯菌株接种于灭菌的固态发酵培养基中进行培养；

F.通过水浴法提取粗酶液并进行酶活力测定得到所述纤维素酶菌株。

所述步骤A、所述步骤B、所述步骤D中的所述无机盐培养基优选包括：以重量份数计，NH₄NO₃1份，K₂HPO₄0.5份，KH₂PO₄0.5份，MgSO₄0.5份，NaCl 1.0份，CaCl₂0.1份，FeCl₃0.02份，酵母膏0.05份，水1000份；和/或，所述步骤A、所述步骤B、所述步骤D中的所述无机盐培养基的PH值优选为7.0～7.2。