[发明专利]高产纤维素酶活力的菌株及其筛选方法和使用方法

权利要求书

1.一种高产纤维素酶活力的菌株，其特征在于，xqx-6，烟曲霉Aspergillus fumigatus，保藏在中国典型培养物保藏中心（CCTCC），保藏号为CCTCC NO.M 2012231。

2.一种权利要求1所述的高产纤维素酶活力的菌株的筛选方法，其特征在于，包括如下步骤：

A.通过纤维素无机盐液体培养基富集培育菌；

B.将步骤A富集培育的菌在浸有无机盐培养基的滤纸上进行一次或多次接种；

C.获取所述滤纸断裂处的培养物并将其在羧甲基纤维素培养基平板上进行一次或多次划线分离，得到纯菌株；

D.将步骤C得到的所述纯菌株在无机盐培养基中进行培养并进行纤维素分解；

E.将步骤D中纤维素分解能力强的所述纯菌株接种于灭菌的固态发酵培养基中进行培养；

F.通过水浴法提取粗酶液并进行酶活力测定得到所述纤维素酶菌株。

3.如权利要求2所述的高产纤维素酶活力的菌株的筛选方法，其特征在于，

所述步骤A、所述步骤B、所述步骤D中的所述无机盐培养基包括：以重量份数计，NH₄NO₃1份，K₂HPO₄0.5份，KH₂PO₄0.5份，MgSO₄0.5份，NaCl1.0份，CaCl₂0.1份，FeCl₃0.02份，酵母膏0.05份，水1000份；和/或，所述步骤A、所述步骤B、所述步骤D中的所述无机盐培养基的pH值为7.0～7.2。

4.如权利要求2所述的高产纤维素酶活力的菌株的筛选方法，其特征在于， 

所述固体发酵培养基包括：以重量份数计，白酒酒糟8份、麸皮4份、Mandels营养液10~50份；所述Mandels营养液包括：按重量份数计，KH₂PO₄2000份、硫酸(NH₄)₂SO₄1400份、MgSO₄.7H₂O 3000份、CaCl₂ 300份、FeSO₄.7H₂O 5份、MnSO₄1.6份、氯化ZnCl₂1.7份、CoCl₂2.0份、溶于1000份蒸馏水；和/或，所述固体发酵培养基的pH值为5.0。

5.如权利要求2-4任一项所述的高产纤维素酶活力的菌株的筛选方法，其特征在于，

在所述步骤A之前，所述筛选方法进一步包括：通过无菌水进行溶解；步骤A包括取所述溶解后的悬液加入到含有纤维素无机盐液体培养基的三角瓶中，静置培养；

和/或，

所述步骤A、和/或所述步骤E中的培育温度为28~32℃，培养时间为5~7天；

和/或，

所述步骤B的接种量为10%；

和/或，

所述步骤D的培养时间为7～28天。

6.如权利要求2-4任一项所述的高产纤维素酶活力的菌株的筛选方法，其特征在于，

所述步骤E包括：

将步骤D得到的分解纤维素能力强的菌株培养成熟，刮下成熟的孢子，制成孢子菌悬液，取3~5mL的孢子菌悬液接种于灭菌的固态发酵培养基中，28~32℃下培养5~9天。

7.如权利要求6所述的高产纤维素酶活力的菌株的筛选方法，其特征在于，所述步骤F包括：

在步骤E的固态发酵培养基中加入80～100毫升蒸馏水，在40～50℃的 水浴提取1～2小时；用四层纱布过滤；

离心分离得上清液；离心速率优选为3500转/分钟；

对上清液进行纤维素酶酶活测定确定为高产纤维素酶活力的菌株。

8.一种利用权利要求2-7任一种所述的筛选方法筛选的权利要求1所述的高产纤维素酶活力的菌株的使用方法，其特征在于，包括：

利用权利要求2-7任一种所述的筛选方法筛选的权利要求1所述的高产纤维素酶活力的菌株；

所述菌株与酿酒酵母复配使用，以白酒丢糟、麸皮为主要原料进行发酵。

9.如权利要求8所述的高产纤维素酶活力的菌株的使用方法，其特征在于，

所述白酒丢糟为湿白酒丢糟。