[发明专利]奶山羊乳房炎病原菌多重PCR检测试剂盒的制备方法

权利要求书

1.一种奶山羊乳房炎病原菌多重PCR检测试剂盒的制备方法，其特征在

于：所述的制备方法为：

1）待检样本DNA提取；

2）设置PCR检测试剂盒：由PCR试剂管、阳性对照、阴性对照、Taq DNA聚合酶、溴酚蓝上样缓冲液（常规使用浓度）组成；

3）PCR扩增：在PCR检测管中加入预处理的DNA样本及Taq DNA聚合酶，同时设置阳性、阴性对照，微量移液器吹打混匀后瞬间高速离心，PCR仪进行扩增反应；

    4）PCR扩增产物分析：将上述PCR扩增产物进行凝胶电泳，与阳性、阴性对照比较待检样本所出现的电泳条带，以判断待检样品是否为金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、乳房链球菌、停乳链球菌、无乳链球菌、克雷伯氏菌的单一或混合感染。

2.根据权利要求1所述的一种奶山羊乳房炎病原菌多重PCR检测试剂盒的制备方法，其特征在于：所述的步骤3）中的PCR进行扩增反应的反应循环条件为：95 ℃预变性4 min，94 ℃变性1 min，60.5 ℃退火90 sec，72 ℃延伸1 min，30个循环后72 ℃延伸8 min，保存PCR产物于4 ℃待检。

3.根据权利要求2所述的一种奶山羊乳房炎病原菌多重PCR检测试剂盒的制备方法，其特征在于：所述的多重PCR检测试剂盒是以原有的PCR检测技术为基础，将多个单一PCR置于同一反应体系、同一反应条件中进行，同时达到对多种致病菌的检测。