[发明专利]一种杂交水稻种子活力氧传感快速测定方法

说明书

技术领域

本发明属于杂交水稻种子测定技术领域，尤其涉及一种杂交水稻种子活力氧传感快速测定方法。

背景技术

种子是农业生产最基本的生产资料，种子活力是种子重要的质量性状，高活力种子具有明显的生长优势和生产潜力，对农业生产具有十分重要的意义。随着种子产业化和信息化的发展，种子活力快速测定在种子质量检测和种子贸易中显得越来越重要。目前种子活力的检测方法可分为幼苗生长特性测定、逆境抗性测定和生化测定三大类，其中最常用的活力测定方法有幼苗生长测定、抗冷测定、低温发芽、加速老化、种子浸出液电导率测定和ATP含量测定等。目前水稻种子活力测定最常用的方法仍然是基于发芽试验的生长测定，常用发芽率、发芽势、发芽指数等指标来评价其活力状况。但在种子发芽试验中常遇到种子因水分偏差、病菌蔓延等原因造成的烂床、霉变，从而导致发芽率不可靠的现象，并且标准发芽试验存在手续烦，设备多，时间长等缺点。多年来，许多种子科学家都在寻找快速方法来代替发芽试验。例如，在豌豆种子活力测定中的标准化方法电导法已广泛应用于大豆、棉花、玉米等种子的活力测定。但电导法在水稻种子活力测定中因稳定性差，因此它主要作为辅助补充方法。经世界许多种子科学家用标准发芽与四唑测定的对比试验表明，四唑测定结果与标准发芽率一般很接近，但检测过程较繁琐，且需要检测者相当的经验，检测效率低。由此可见，目前的活力测定方法无法适应现代规模化的大批量种子的快速测定。

氧传感技术(Q2技术)是荷兰ASTEC Global公司基于荧光猝灭原理开发的，通过测定种子萌发过程中的耗氧量来鉴定种子的质量水平。其自动化检测的特点为种子活力的快速检测提供了有效途径。但目前氧传感技术目前仅用于少数几个植物(如甜菜、番茄、辣椒、杉木、马尾松等)种子的活力检测。笔者多年的研究结果表明，氧代谢指标IMT(萌发启动时间)与杉木和马尾松种子活力相关关系不稳定，但其它指标如氧气消耗速率(OMR)与它们的活力呈正相关、与理论萌发时间(RGT)、关键氧气压力(COP)呈负相关。笔者利用氧传感技术检测引发后番茄种子的活力获得了与发芽试验一致的结果，引发后番茄种子的活力显著提高(IMT、RGT值降低，OMR值增加)，与发芽试验中发芽势、发芽指数反映的结果一致。但并不是所有的氧代谢指标均能较好的反映其活力状况，一些氧代谢指标与上述植物种子活力之间的关系并不密切，氧传感检测方法的准确性还有待进一步验证。但水稻种子目前还没有专门的氧传感测定程序，且迄今未见应用氧传感技术检测杂交水稻种子活力的报道。

发明内容

针对上述问题，本发明实施例的目的在于提供一种快速、准确的杂交水稻种子活力氧传感快速测定方法。

本发明实施例是这样实现的，一种杂交水稻种子活力氧传感快速测定方法，所述测定方法包括以下步骤：

称取琼脂，加入超纯水，配制琼脂溶液，加热至全溶，每个塑料试管加入琼脂溶液，待冷却；

夹取种子，放入装有已凝固琼脂的塑料试管中，每个塑料试管中装一粒水稻种子，在托板的边缘贴上标签，标注样品及重复；

待种子全部放入塑料试管后，统一盖上盖子，最后将托板按样品及重复依次摆放在Q2仪(氧传感仪)上；

打开Q2的运行程序，创建新程序，对每个托板进行设置；设置运行时间、测定间隔时间、运行温度等参数信息，以及样品名称、重复编号；

开始自动化测量，每次测量记录1次氧气浓度，Q2软件会根据测定的氧气浓度和时间绘制成耗氧曲线，计算氧代谢指标。

进一步，所述琼脂溶液的配置方法为：

称取琼脂5.0g，加入1000ml超纯水，配制0.4％～0.6％琼脂溶液，加热至全溶，每个塑料试管加入琼脂溶液1000μl，待冷却。

进一步，所述杂交水稻种子活力氧传感快速测定方法，根据水稻种子大小选用1.5ml的塑料试管。

进一步，所述的杂交水稻种子活力氧传感快速测定方法在加琼脂溶液的过程中，根据水稻种子的呼吸强度在每个塑料试管中加入琼脂溶液1000μl。

进一步，每次程序运行16个托板，每次取4个水稻品种，每个品种设4次重复，一个托板48粒种子为一次重复。

进一步，用镊子夹取种子，放入装有已凝固琼脂的塑料试管中，每个塑料试管中装一粒水稻种子，以靠近种胚部分接触琼脂面为宜。

进一步，所述快速测定方法中水稻种子以0.5％的浓度为最佳。