[发明专利]一种杂交水稻种子活力氧传感快速测定方法

权利要求书

1.一种杂交水稻种子活力氧传感快速测定方法，其特征在于，所述测定方法包括以下步骤：

称取琼脂，加入超纯水，配制琼脂溶液，加热至全溶，每个塑料试管加入琼脂溶液，待冷却；

夹取种子，放入装有已凝固琼脂的塑料试管中，每个塑料试管中装一粒水稻种子，在托板的边缘贴上标签，标注样品及重复；

待种子全部放入塑料试管后，统一盖上盖子，最后将托板按样品及重复依次摆放在Q2仪(氧传感仪)上；

打开Q2的运行程序，创建新程序，对每个托板进行设置；设置运行时间、测定间隔时间、运行温度等参数信息，以及样品名称、重复编号；

开始自动化测量，每次测量记录1次氧气浓度，Q2软件会根据测定的氧气浓度和时间绘制成耗氧曲线，计算氧代谢指标。

2.如权利要求1所述的杂交水稻种子活力氧传感快速测定方法，其特征在于，所述琼脂溶液的配置方法为：

称取琼脂5.0g，加入1000ml超纯水，配制0.4％～0.6％琼脂溶液，加热至全溶，每个塑料试管加入琼脂溶液1000μl，待冷却。

3.如权利要求1所述的杂交水稻种子活力氧传感快速测定方法，其特征在于，所述杂交水稻种子活力氧传感快速测定方法，根据水稻种子大小选用1.5ml的塑料试管。

4.如权利要求1所述的杂交水稻种子活力氧传感快速测定方法，其特征在于，所述的杂交水稻种子活力氧传感快速测定方法在加琼脂溶液的过程中，根据水稻种子的呼吸强度在每个塑料试管中加入琼脂溶液1000μl。

5.如权利要求1所述的杂交水稻种子活力氧传感快速测定方法，其特征在于，每次程序运行16个托板，每次取4个水稻品种，每个品种设4次重复，一个托板48粒种子为一次重复。

6.如权利要求1所述的杂交水稻种子活力氧传感快速测定方法，其特征在于，用镊子夹取种子，放入装有已凝固琼脂的塑料试管中，每个塑料试管中装一粒水稻种子，以靠近种胚部分接触琼脂面为宜。

7.如权利要求1所述的杂交水稻种子活力氧传感快速测定方法，其特征在于，所述快速测定方法中水稻种子以0.5％的浓度为最佳。

8.如权利要求1所述的杂交水稻种子活力氧传感快速测定方法，其特征在于，放置在密闭试管中的杂交水稻种子在不同的光温条件下的耗氧曲线是不同的，水稻种子在20-30℃，光照或黑暗条件下均比较合适，尤以25℃黑暗条件下最适宜。

9.如权利要求1所述的杂交水稻种子活力氧传感快速测定方法，其特征在于，检测时间的确定方法为：

为保证每次重复48粒种子萌发，杂交籼稻和杂交粳稻种子在密闭试管中需分别培养60h和140h；此外，为保证耗氧曲线的完整性，每次检测间隔的时间以30min最佳。

10.如权利要求1所述的杂交水稻种子活力氧传感快速测定方法，其特征在于，确定1.5ml试管后，还需选择试管盖的大小。试管盖除与试管匹配外，拧紧后其空间空气体积以300μl为宜。最后将荧光染料涂在试管盖顶端内侧，以利于仪器扫描。