[发明专利]一种抗鹌鹑IgG单克隆抗体及其在制备鹌鹑血清中抗体检测试剂盒中的应用

权利要求书

1.一种抗鹌鹑IgG单克隆抗体QIgG-5F11，其特征在于，它是由抗鹌鹑IgG单克隆抗体杂交瘤细胞株QIgG-5F11分泌得到，所述抗鹌鹑IgG单克隆抗体杂交瘤细胞株QIgG-5F11的保藏编号是CGMCC No.6655。

2.一种检测鹌鹑血清中抗体的间接ELISA检测试剂盒，包括以下成分：

（1）包被了不同抗原的ELISA包被板；

（2）辣根过氧化物酶标记的抗鹌鹑IgG单克隆抗体；

（3）洗涤液：0.01mol/L 磷酸盐缓冲液；

（4）显色试剂：TMB粉剂，3%H₂O₂，底物缓冲液；

（5）阴性对照：未免疫鹌鹑阴性血清

（6）阳性对照：阳性血清。

3.根据权利要求1所述的一种间接ELISA检测试剂盒检测鹌鹑血清中抗体的方法，其步骤包括：

（1）待检血清作为第一抗体与酶标板上包被的抗原进行反应

   将待检血清用0.01mol/L 磷酸盐缓冲液1:00稀释，在酶标板的每个孔中加入100μL，于37℃恒温水浴箱中放置60min；同时加阴性对照、阳性对照；

（2）洗涤

用PBST洗3次，每次3min，甩干；

（3）加辣根过氧化物酶标记的抗鹌鹑IgG单克隆抗体为二抗

将标记的二抗QIgG-5F11^E，稀释到最佳工作浓度，在酶标板的每个孔中加入100μL，于37℃恒温水浴箱中放置60min；

（4）洗涤

用PBST洗5次，每次3min，甩干；

（5）显色

加入新鲜配制的TMB底物，100μL/孔，37℃反应15-20min；

（6）终止

显色后，每孔加入50μL 2mo1/L H₂SO₄终止反应；

（7）结果判定

酶标仪读值，测定各孔OD450nm值，进行结果判定。