[发明专利]一种鉴别奥利亚罗非鱼、尼罗罗非鱼及其杂交鱼的方法有效

专利信息
申请号: 201210384347.1 申请日: 2012-10-11
公开(公告)号: CN102864241A 公开(公告)日: 2013-01-09
发明(设计)人: 李建林;俞菊华;唐永凯;李红霞;徐跑 申请(专利权)人: 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68
代理公司: 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 代理人: 楼高潮
地址: 214081 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 鉴别 奥利亚 罗非鱼 罗罗 及其 杂交 方法
【权利要求书】:

1.一种鉴别奥利亚罗非鱼、尼罗罗非鱼及其杂交鱼的方法,其特征在于包括以下步骤:

(1)采集待鉴别的罗非鱼样品,提取基因组DNA;

(2)用步骤(1)获得的基因组DNA为模板,进行PCR扩增;

(3)将步骤(2)获得的PCR扩增产物进行电泳检测;

(4)根据步骤(3)的电泳检测结果,鉴别奥利亚罗非鱼、尼罗罗非鱼及奥利亚罗非鱼和尼罗罗非鱼杂交鱼:尼罗罗非鱼电泳检测结果有1条178bp的条带,奥利亚罗非鱼有1条187bp的条带,尼罗罗非鱼和奥利亚罗非鱼的杂交鱼有2条条带,分别为178bp和187bp。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述步骤(2)中,PCR扩增采用的正义引物序列为:5′AATAAAACAGTTGATGGTGA 3′,反义引物为:5′ˊ AAATGAAGAAACGCCCTCTT 3′。

3.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述步骤(2)中,PCR体系总体积20 μL,其中含10×反应缓冲液2 μL,Mg2+ 2 mmol/L,dNTP 200μmol/L,上下游引物各0.2μmol/L,Taq酶0.5U,DNA模板 100 ng~200 ng,用灭菌双蒸馏水补足体积。

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