[发明专利]一种单核细胞太空培养基及其制备方法无效
申请号: | 201210379619.9 | 申请日: | 2012-09-26 |
公开(公告)号: | CN103060270A | 公开(公告)日: | 2013-04-24 |
发明(设计)人: | 刘长庭;郭英华;郭娜;方向群;王俊峰;李天志;常德;苏龙翔;陈振鸿;王立 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军总医院 |
主分类号: | C12N5/0786 | 分类号: | C12N5/0786 |
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地址: | 100853*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 单核 细胞 太空 培养基 及其 制备 方法 | ||
1.一种单核细胞太空培养基,其特征在于:单核细胞太空培养基由下列物质按一定百分比组成:35%~45%的无L-谷氨酰胺、无HEPES的1640基础培养基,4%~5%的3g/L L-谷氨酰胺,0.01%~0.015%的1.5mg/L氢化可的松,50%~60%的胎牛血清,1%的1000U/ml青霉素和链霉素。
2.配制500mL权利要求1所述的单核细胞太空培养基,其特征在于:所需上述物质分别为:225mL的无L-谷氨酰胺、无HEPES的1640基础培养基,25mL的3g/L L-谷氨酰胺,0.075mL的1.5mg/L氢化可的松,250mL的胎牛血清,1mL的1000U/mL青霉素和链霉素。
3.单核细胞太空培养基的制备方法,其特征在于:具体配置过程为:
①向无L-谷氨酰胺、无HEPES的1640培养基中依次加入浓度为3g/L的L-谷氨酰胺及浓度为1.5mg/L氢化可的松,配制为无血清单核细胞太空培养基;
②按权利要求1所述的比例再取胎牛血清及青霉素和链霉素加入到无血清单核细胞太空培养基中,充分混合均匀;
③上述过程均在超净工作台上完成,严格遵守无菌操作原则,配制好的培养基放4℃储存备用。
4.利用权利要求1和2所述的单核细胞太空培养基,其特征在于:培养单核细胞的具体步骤为:首先将培养基37℃复温,其次以800r/min~1000r/min的速度将地面培养的单核细胞离心5min进行细胞收集,血细胞计数板计数细胞数量,最后按照105个/mL的密度将细胞接种于装有太空培养基的搭载装置中,密闭保存运输。
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