[发明专利]异常毕赤酵母

说明书

技术领域

本发明涉及异常毕赤酵母，属于微生物领域。

背景技术

高档次白酒深受消费者欢迎，但质高量少，其价格也逐年上涨。大量高档次以下的白酒需要使用成香成味物质含量较高的调味酒来进行勾调，从而达到较高的质量水平，符合相应的质量标准。

传统的调味酒生产是以纯粮固态和半固态发酵的工艺模式进行的，一般使用大曲作为糖化发酵剂，而利用大曲中的多种细菌、酵母菌、霉菌和各种酶类（淀粉酶、果胶酶、纤维素酶、酸性蛋白酶等酶类）共同作用而获得目的产物。而现代调味酒生产逐渐趋向于纯菌种发酵，根据风味要求的不同，使用特殊功能性菌种进行相应风味调味酒的生产。其中，酯香调味酒的生产主要利用产酯酵母进行发酵。在生物领域，酵母作为模式生物，常用来作为表达外源基因的宿主菌。毕赤酵母作为一种甲醇利用型酵母菌,自20世纪80年代年开发以来，通过不断的研究，至今已有多个种属被开发出来，主要包括Candida和Pichia两个种属，共有30余种。其中尤以毕赤酵母发展最快，研究最清楚，也是目前行业内生产酯香调味酒使用较多的菌种之一。但由于酿酒行业是一个传统行业，从食品安全角度考虑，目前国内还未有酒类企业对外宣称利用转基因菌株直接进行白酒生产。因而，通过自然选育，并使用传统人工诱变的方式是目前酒类行业获取特殊功能性菌株的常用途径。尽管一些企业和研究机构对EA风味物质的生成进行过研究，也获得了一些高产乙酸乙酯的特殊功能性菌株，其相比传统大曲，虽然在产酯能力上有所提升，但总体上来看产酯量仍不能满足生产要求。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一株高产乙酸乙酯的异常毕赤酵母。

本发明提供的异常毕赤酵母Pichia anomala JNC-EA002，该菌株于2012年4月6日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），保藏号为CGMCC No.5955，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，邮编100101。

该菌株特点如下：在麦芽汁琼脂培养基上，30℃，培养24h后，菌落略突起，乳白色，表面褶皱，边缘平滑。通过显微镜观察，该菌株细胞形态为球形、卵圆形至长圆形，出牙生殖。

本发明还提供了异常毕赤酵母在生产乙酸乙酯中的用途。

本发明还提供了异常毕赤酵母在酿酒中的用途。

本发明还提供了异常毕赤酵母在生产调味酒中的用途。

本发明的菌株异常毕赤酵母Pichia anomala JNC-EA002，是从剑南春集团有限责任公司的曲药和糟醅中分离得到，先通过生产性能选育，再经过进一步紫外线（UV）诱变所获得的一株高产乙酸乙酯的菌株。

本发明菌株采用下述流程进行选育：

样品采集→增殖培养→纯种分离→生产性能测试→制备菌悬液→诱变前培养→诱变→变异菌株的分离筛选→遗传稳定性试验

本发明的有益效果：本发明的异常毕赤酵母产酯能力强，传代性好，适合长期规模化生产使用。本发明的异常毕赤酵母的产酯能力可达到8.75g/L，为乙酸乙酯的生产提供了新的选择；也可用于酿酒生产和调味酒的生产。

本发明提供的异常毕赤酵母Pichia anomala JNC-EA002，该菌株于2012年4月6日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），保藏号为CGMCC No.5955。

附图说明

图1、多株菌株代谢产物中乙酸乙酯的含量，纵坐标为乙酸乙酯的含量（单位g/L）。

图2、出发株和诱变株产酯能力分析，纵坐标为乙酸乙酯的含量（单位g/L）。

具体实施方式

本发明的异常毕赤酵母Pichia anomala JNC-EA002已于2012年4月6日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），保藏号为CGMCC No.5955，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，邮编100101。

该菌株特点如下：在麦芽汁琼脂培养基上，30℃，培养24h后，菌落略突起，乳白色，表面褶皱，边缘平滑。通过显微镜观察，该菌株细胞形态为球形、卵圆形至长圆形，出牙生殖。

本发明还提供了异常毕赤酵母在生产乙酸乙酯中的用途。

本发明还提供了异常毕赤酵母在酿酒中的用途。

本发明还提供了异常毕赤酵母在生产调味酒中的用途。