[发明专利]一种奥曲肽粗品的固相制备方法

权利要求书

1.一种奥曲肽粗品的固相制备方法，依次连接具有Fmoc或Boc保护基团的氨基酸，获得保护的八肽树脂，同步进行脱侧链保护基团及切肽，获得奥曲肽粗品，其特征在于，依次包括如下步骤：

(a)获得Fmoc-Thr-树脂；

(b)在上述的树脂中，加入脱保护剂进行处理后，将具有Fmoc或Boc保护基团的氨基酸、缩合剂和含有步骤(a)获得的树脂的溶液混合，进行接肽反应，然后再加入脱保护剂处理，再将具有Fmoc或Boc保护基团的氨基酸、缩合剂和含有经过接肽反应获得的多肽树脂的溶液混合，进行接肽反应，如此重复，获得Fmoc或Boc-D-Phe¹-Cys²(Trt)-Phe³-D-Trp⁴(Boc)-Lys⁵(Boc)-Thr⁶(tBu)-Cys⁷(Trt)-Thr⁸-OL-树脂；

所说的具有Fmoc保护基团的氨基酸，依次为：

(1)Fmoc-Thr-OL、

(2)Fmoc-Cys(Trt)-OH或Fmoc-Cys(Acm)-OH、

(3)Fmoc-Thr(tBu)-OH、(4)Fmoc-Lys(Boc)-OH或Fmoc-Lys(Dde)-OH、

(5)Fmoc-D-Trp(Boc)-OH、

(6)Fmoc-Phe-OH、

(7)Fmoc-Cys(Trt)-OH或Fmoc-Cys(Acm)-OH、

(8)Fmoc或Boc-D-Phe-OH。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，连接7位残基的Fmoc-Cys(Trt)-OH前进行的脱保护处理次数是连接其它氨基酸残基前的1-2倍。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，连接7位或2位残基的Fmoc-Cys(Trt)-OH时，缩合剂包括HOBt和DIC。

4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，1-5倍量的Fmoc-Cys(Trt)-OH,1-5倍量的HOBt,1-5倍量的DIC试剂，溶解在4-8ml/g树脂的DMF溶剂中的混合溶液，在0－40℃反应30-60分钟后，再次加入1-5倍量的DIC试剂，在15－30℃反应3-10个小时。

5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，依次连接6至3位残基的Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-D-Trp(Boc)-OH和Fmoc-Phe-OH时，或连接1位残基的Fmoc或Boc-D-Phe-OH时，缩合剂包括HOBt、DIEA和HBTU。

6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，1-5倍量的Fmoc或Boc保护氨基酸,1-5倍量的HOBt,1-5倍量的DIEA试剂，溶解在4-8ml/g树脂的DMF溶剂中，然后再加入1-5倍量的HBTU，15－30℃反应3-10个小时。

7.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(a)为1-5倍量的Fmoc-Thr,1-5倍量的四叔丁基硝酸铵,1-5倍量的无水吡啶，溶解在4-8ml/g树脂的无水DCM溶剂中；加入到装有固相合成树脂(替代率0.3-1.0mmol/g)的反应釜中，15-30℃反应3-5小时。

8.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(a)为1-5倍量的Fmoc-Cys(Trt)-Thr-Ol,1-5倍量的四叔丁基硝酸铵,1-5倍量的无水吡啶，溶解在4-8ml/g树脂的无水DCM溶剂中；加入到装有固相合成树脂(替代率0.3-1.0mmol/g)的反应釜中，15-30℃反应3-5小时。

9.如权利要求1-8任一项所述的制备方法，其特征在于，所述固相合成树脂选自三苯甲基氯树脂，4-甲基三苯甲基氯树脂或氨基-2-氯三苯甲基树脂。

10.如权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述固相合成树脂是2-CTC树脂。