[发明专利]定性检测KRAS基因分型的测序引物对及其试剂盒

权利要求书

1.一种定性检测KRAS基因分型的测序引物对，其特征在于，所述引物对为SEQ IDNO.1和SEQ ID NO.4所示的正向扩增引物，SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.5所示的反向扩增引物，SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.6所示的测序引物；其中，SEQ ID NO.1和SEQ IDNO.5所示引物的5’端进行生物素标记。

2.一种定性检测KRAS基因分型的测序试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括含有SEQ ID NO.2所示反向扩增引物的PCR反应液1，含有SEQ ID NO.4所示正向扩增引物的PCR反应液2，SEQ ID NO.1所示的正向扩增引物，SEQ ID NO.5所示的反向扩增引物，SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.6所示的测序引物；其中，SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.5所示引物的5’端进行生物素标记。

3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还包括SEQ ID NO.7所示的质控品和空白对照品。

4.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述空白对照品为水。

5.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括KRAS1213阳性对照品1，KRAS1213阳性对照品2，；KRAS61阳性对照品1，KRAS61阳性对照品2；

所述KRAS1213阳性对照品1为插有SEQ ID NO.8所示核苷酸序列的KRAS1213野生纯合子质粒；所述KRAS1213阳性对照品2为所述KRAS1213野生纯合子质粒与插有SEQ ID NO.9所示核苷酸序列的KRAS1213突变纯合子质粒组成的质粒混合物；

所述KRAS61阳性对照品1为插有SEQ ID NO.10所示核苷酸序列的KRAS61野生纯合子质粒；KRAS61阳性对照品2为所述KRAS61野生纯合子质粒与插有SEQ ID NO.11所示核苷酸序列的KRAS61突变纯合子质粒组成的质粒混合物；

其中，质粒载体为pMD18-T质粒。

6.如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述KRAS1213质粒混合物中KRAS1213突变纯合子质粒和所述KRAS1213野生纯合子质粒的数量比为1:1。

7.如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述KRAS61质粒混合物中KRAS61突变纯合子质粒和所述KRAS61野生纯合子质粒的数量比为1:1。