[发明专利]定性检测TPMT基因亚型的测序引物对及其试剂盒有效
申请号: | 201210348325.X | 申请日: | 2012-09-19 |
公开(公告)号: | CN102899407A | 公开(公告)日: | 2013-01-30 |
发明(设计)人: | 陈艳 | 申请(专利权)人: | 长沙三济生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 长沙正奇专利事务所有限责任公司 43113 | 代理人: | 卢宏 |
地址: | 410205 湖南省长沙*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 定性 检测 tpmt 基因 引物 及其 试剂盒 | ||
1.一种定性检测TPMT基因分型的测序引物对,其特征在于,所述引物对为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.4所示的正向扩增引物,SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.5所示的反向扩增引物,SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.6所示的测序引物;其中,SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.5所示引物的5’端进行生物素标记。
2.一种定性检测TPMT基因分型的测序试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括含有SEQ ID NO.1所示正向扩增引物的PCR反应液1,含有SEQ ID NO.4所示正向扩增引物的PCR反应液2,SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.5所示的反向扩增引物,SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.6所示的测序引物;其中,SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.5所示引物的5’端进行生物素标记。
3.如权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中还包括SEQ ID NO.7所示的质控品和空白对照品。
4.如权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述空白对照品为水。
5.如权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括TPMT 460阳性对照品1,TPMT 460阳性对照品2,TPMT 460阳性对照品3;TPMT 719阳性对照品1,TPMT719阳性对照品2,TPMT 719阳性对照品3;
所述TPMT 460阳性对照品1为插有SEQ ID NO.8所示核苷酸序列的TPMT 460野生纯合子质粒;所述TPMT 460阳性对照品2为插有SEQ ID NO.9所示核苷酸序列的TPMT460突变纯合子质粒;TPMT 460阳性对照品3为由所述TPMT 460突变纯合子质粒和所述TPMT 460野生纯合子质粒组成的TPMT 460质粒混合物;
所述TPMT 719阳性对照品1为插有SEQ ID NO.10所示核苷酸序列的TPMT 719野生纯合子质粒;TPMT 719阳性对照品2为插有SEQ ID NO.11所示核苷酸序列的TPMT 719突变纯合子质粒;TPMT 719阳性对照品3为由所述TPMT 719突变纯合子质粒和所述TPMT 719野生纯合子质粒组成的TPMT 719质粒混合物;
其中,质粒载体为pMD18-T质粒。
6.如权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述TPMT 460质粒混合物中TPMT 460突变纯合子质粒和所述TPMT 460野生纯合子质粒的数量比为1:1。
7.如权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述TPMT 719质粒混合物中TPMT 719突变纯合子质粒和所述TPMT 719野生纯合子质粒的数量比为1:1。
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