[发明专利]一种快速筛选抗黑曲霉的活性物质的方法无效

专利信息
申请号: 201210346418.9 申请日: 2012-09-18
公开(公告)号: CN102851351A 公开(公告)日: 2013-01-02
发明(设计)人: 陈建明;胡彬;王蔚;陈卓;李芊;杨慧 申请(专利权)人: 国家海洋局第三海洋研究所
主分类号: C12Q1/18 分类号: C12Q1/18;C12R1/685
代理公司: 厦门市诚得知识产权代理事务所 35209 代理人: 赖开慧
地址: 361000 *** 国省代码: 福建;35
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摘要:
搜索关键词: 一种 快速 筛选 曲霉 活性 物质 方法
【权利要求书】:

1.一种快速筛选抗黑曲霉的活性物质的方法,其特征在于,包括如下步骤:

将待筛选样品,刃天青,黑曲霉孢子菌悬液加入到96微孔板中,在37℃恒温培养箱中培养一定时间,其中设置阴性对照和阳性对照;优选培养12-36h;

得到结果;

根据结果筛选。

2.权利要求1的方法,其特征在于,所述的得到结果为:微孔板的颜色,酶标仪测量荧光值,和抑制率。

3.权利要求2的方法,其特征在于,所述的根据结果筛选为:微孔板的颜色为蓝色或紫色,酶标仪测量荧光值低于15000,抑制率为40%以上。

4.权利要求2的方法,其特征在于,所述酶标仪测量激发波长550nm发射波长590nm处的荧光值。

5.权利要求2的方法,其特征在于,所述抑制率的计算公式为:

抑制率%=100%-(实验孔荧光值-阳性对照荧光值)/(阴性对照荧光值-阳性对照荧光值)*100%。

6.权利要求1的方法,其特征在于,所述阴性对照为无菌水代替待筛选样品;阳性对照为176ulRPMI-1640培养基代替黑曲霉孢子菌悬液。

7.权利要求1所述的方法,其特征在于,

将4 微升待筛选样品,20微升200ug/ml刃天青和176微升2.5×104spores/ml黑曲霉孢子菌悬液加入到96微孔板中,在37℃恒温培养箱中培养24h;

24h后观察微孔板的颜色变化,并用酶标仪测量激发波长550nm发射波长590nm处的荧光值,然后在由荧光值计数出抑制率;取颜色为蓝色或紫色、荧光值低于15000,抑制率为40%以上的微孔,并显微镜观察。

8.权利要求1-7任一方法,其特征在于,待筛选样品为海洋微生物发酵液提取物。

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