[发明专利]一种盐酸万古霉素的精制方法

说明书

技术领域

本发明属于提纯技术领域，具体涉及一种盐酸万古霉素的精制方法。

背景技术

盐酸万古霉素是美国礼来公司于1958年开发的，放线菌属东方拟无枝菌酸菌在适宜的条件下发酵产生的糖肽类抗生素。由于盐酸万古霉素与其它抗生素无交叉耐药，对耐药的金黄色葡萄球菌等有较强的杀灭作用，始终为临床医生所关注。但过去文献报道认为，万古霉素有严重的肾、耳毒性，故在临床未被广泛使用。

近年来由于抗生素的大量使用，导致临床上耐甲氧西林金葡菌（MASA）感染病例日益增多，这种感染对手术后患者，及低免疫力患者是致命的。盐酸万古霉素因其所具有的独特的对革兰氏阳性菌的抑制机理，被公认为是为数不多的、可用于治疗复杂的耐甲氧西林金葡菌（MASA）感染化学疗剂。同时由于近年来新科学技术的不断发展和运用，使得药用盐酸万古霉素纯度在不断提高。相应的，过去认为盐酸万古霉素所具有的严重的肾、耳毒性在不断减少。基于上述这些原因，盐酸万古霉素在临床治疗方面起着越来越重要的作用。这样，建立一个简便可行、低污染、适用于工业化生产的精制工艺，制造出高纯度的、符合药用标准的盐酸万古霉素有着重要的意义。

万古霉素由其分子化学结构（图1）上来看，为糖肽类化合物，有很好的水溶性；同时以肽链中的酚羟基与二糖成甙键，这样的结构决定了它对酸，碱尤其是热的不稳定性，一旦过酸、过碱，尤其是受热容易造成甙键断裂，失去二糖。结构还带有多个游离酚羟基，导致其易氧化成醌式——这可能与终产品常常带有浅粉红色有关。同时糖结构上带有一游离氨基，具有弱碱性，可与盐酸形成盐，而所带的多个游离酚羟基具有弱酸性，因此是一两性化合物，有报道称其等电点是pH 8.1。正是由于万古霉素化学结构的这些特点，给制造高纯度盐酸万古霉素造成一定的困难。

盐酸万古霉素已开发多年，早期的精制方法多采用结晶或沉淀技术，经过滤、热真空干燥，得到成品。即往已处理到一定纯度的盐酸万古霉素溶液中加入能与水互溶的有机溶媒如甲醇、乙醇、异丙醇、丁醇、丙酮、乙腈等使之产生结晶或沉淀，离心或过滤实现固液分离，固体部分经加热真空干燥，去除水分及有机溶媒得到产品。采用这种方法所制造的产品纯度往往在85 - 93%之间，达不到中国药典2010版及欧洲药典6.0版纯度在93%以上的要求。

近年来各种介质的色谱分离技术在盐酸万古霉素纯化方面得到广泛应用，使得纯化液中盐酸万古霉素纯度都能在95%以上。中国专利200710187300.5采用葡聚糖Sephadex CM-25 及 琼脂糖SP Sepharose  或 CM Sepharose 色谱分离技术，使纯度为88%的万古霉素粗品液纯化成纯度为95%纯化液，纯化回收率约为70%。 EP1824874采用反向硅胶（Octadecyl silica gel）分离万古霉素粗品，可得到纯度为97%纯化液。WO2006/004238使用疏水性吸附树脂 AmberchromCG-161分离，可使纯化液纯度达到95%以上。尽管采用色谱分离技术截获的纯化液（水溶液）盐酸万古霉素纯度都能在95%以上，药品制造规范往往要求制造过程后期有一道结晶或沉淀工序，实现固液分离以去除母液中可能存在的潜在杂质，而不宜直接冷冻干燥或喷雾干燥制成产品。因此上述几个专利均采用加入有机溶媒结晶或沉淀的方法，实现固液分离。所得固体经加热、真空干燥制得成品。事实上盐酸万古霉素由于化学结构上的特点，要得到各项标准均能达到药典要求的产品，对结晶条件如溶媒、温度、搅拌速度等有一定限制，这样就造成结晶晶体细而粘不易过滤。更困难的是所得到的固体需要加热、真空干燥才能达到水分含量小于5%及残留溶媒小于0.5%的药典要求。而加热往往会造成盐酸万古霉素纯度的显著的下降和澄清度不合格——这可能与盐酸盐受热分解有关。