[发明专利]一种原儿茶酸的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种分析检测原儿茶酸的新型方法，具体地说是建立一种以四氮杂大环铜配合物-[CuL](ClO₄)₂为催化剂的经典非线性化学振荡体系，通过体系对加入不同浓度原儿茶酸产生的相应变化做到对原儿茶酸的分析和测定。

背景技术

原儿茶酸，学名3，4-二羟基苯甲酸，其广泛存在于狗脊、冬青、乌蕨等中草药中，它对绿脓杆菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌、产碱杆菌及枯草杆菌和金黄色葡萄球菌均有不同程度的抑菌作用，并有收敛促进伤口愈合的作用。故临床上用于治疗烧伤、小儿肺炎、菌痢、急性胰腺炎、慢性气管炎。同时其平喘、祛痰、解蛇毒等部分功效国内亦有相关报道。原儿茶酸不仅应用于医药中间体、染料等亦作为一种分析试剂，目前国内通常用薄层扫描法、高效液相色谱法、反相高效液相色谱法、荧光测定法等检测原儿茶酸的浓度。

发明内容

本发明旨在对原儿茶酸提供一种新的检测方法，即以四氮杂大环铜配合物-[CuL](ClO₄)₂催化的非线性化学振荡体系检测原儿茶酸的方法，本方法的依据是由于振荡反应体系的状态变量(浓度、温度、反应速率等)随时间发生周期性变化，当向振荡体系中加入干扰物时，只要能对振荡反应的某一基元反应产生影响，就会干扰振荡行为，改变振荡曲线的形态，对这种改变所反映的化学信息(如振荡振幅、周期、频率等)进行分析，建立这种变化量与待测物浓度的关系，从而进行分析测定。具体地说是将一系列不同浓度的原儿茶酸样本溶液加入到非线性化学体系中，根据样本溶液中原儿茶酸的不同浓度与相应的振荡图谱的变化的对应关系建立工作曲线进而实现对试样进行定量分析。

本发明所称的四氮杂大环铜配合物催化剂是5，7，7，12，14，14-六甲基-1，4，8，11-四氮杂大环-4，11-二烯为配体的四氮杂大环铜(II)配合物，有以下化学式，并记作[CuL](ClO₄)₂：

本配合物结构与生命体里肌红蛋白，血红蛋白，叶绿素和一些酶的关键结构卟啉环很相似，这种以[CuL](ClO₄)₂催化的化学振荡反应和植物和动物细胞体内的生化振荡类似，因此，该体系具有稳定的振幅，较长的振荡寿命，及对原儿茶酸的敏锐响应。

[CuL](ClO₄)₂的制备分两部：1)制备L·2HClO₄，2)再由L·2HClO₄制备[CuL](ClO₄)₂。

1)制备L·2HClO₄：将98.5mL乙二胺装入一只500mL三颈瓶中，在冰浴条件下，120分钟内搅拌下缓慢滴加126mL70％高氯酸。最初的反应剧烈并伴有白烟产生，所以滴加速度控制在每5秒钟1滴。随着反应进行可以适当加快滴加速度，直到滴加完为止，得到透明的溶液。仍然在冰水浴的条件下，向该透明溶液加入224mL无水丙酮并剧烈搅拌，溶液很快变浑浊同时形成非常粘稠混合物。仍然在冰水浴的条件下保持2-3小时以便充分反应。将所得产物转移到布氏漏斗进行抽滤分离，并用丙酮充分洗涤，可得纯白色固体。将此纯白色固体在热的甲醇-水溶液中重结晶，用硅胶干燥剂真空干燥，得80g白色晶体，此白色晶体为L·2HClO₄。(参考文献：

1.Curtis，N.F.and Hay，R.W.，J.Chem.Soc.，Chem.Commun.，1966，p.534.

2.Gang Hu，Panpan Chen，Wei Wang，Lin Hu，Jimei Song，Lingguang Qiu，Juan Song，Electrochimica Acta，2007，Vol.52，pp.7996-8002.

3.Lin Hu，Gang Hu，Han-Hong Xu，J.Anal.Chem.，2006，Vol.61，No.10，pp.1021-1025.

4.胡刚，中国科学技术大学博士论文，p25-27，合肥，2005年)