[发明专利]一种含有HPV16的L1蛋白编码基因的质粒载体及其构建方法

权利要求书

1.一种含有HPV16的L1蛋白编码基因的质粒载体，具有SEQID No.1所示的HPV16的L1蛋白编码基因核苷酸序列。

2.根据权利要求1所述的含有HPV16的L1蛋白编码基因的质粒载体，其特征在于，所述HPV16的L1蛋白编码基因的3′端有终止子和Hind III酶切位点，5′端紧密链接HBM分泌信号肽序列，其5′端有BamH I酶切位点；所述含有HPV16的L1蛋白编码基因的质粒载体，含有SEQ ID No.2所示的核苷酸序列。

3.根据权利要求1所述的含有HPV16的L1蛋白编码基因的质粒载体，其特征在于，其出发载体为pFastBac1载体，以pFastBac1载体为出发载体构建的含有HPV16的L1蛋白编码基因的质粒载体为pFastBac1-HPV16L1。

4.根据权利要求3所述的含有HPV16的L1蛋白编码基因的质粒载体，其特征在于，所述pFastBac1-HPV16L1的抗性基因为庆大霉素抗性基因和氨苄青霉素抗性基因。

5.权利要求1-4任一项所述含有HPV16的L1蛋白编码基因的质粒载体的构建方法，包括如下步骤：

a、人工合成SEQ ID No.2所示的核苷酸序列，并克隆于pGH载体，命名为pGH-B2188G；

b、BamH I和Hind III酶切消化pGH-B2188G和pFastBac1，胶回收试剂盒分别回收1668bp目的片段及4665bp载体片段，按照4:1比例，16℃连接15小时，氯化钙法转化大肠杆菌DH5，涂布于含有100μg/ml氨苄青霉素的LB琼脂平板，筛选阳性克隆，提取质粒，得到含有HPV16的L1蛋白编码基因的质粒载体。

6.权利要求1-4任一项所述含有HPV16的L1蛋白编码基因的质粒载体在重组蛋白质生产中的应用。

7.权利要求1-4任一项所述含有HPV16的L1蛋白编码基因的质粒载体在疫苗生产中的应用。