[发明专利]一种维生素B2的酶联免疫检测试剂盒无效
申请号: | 201210320690.X | 申请日: | 2012-09-03 |
公开(公告)号: | CN102809658A | 公开(公告)日: | 2012-12-05 |
发明(设计)人: | 郗日沫;王鹏;张太昌;孟萌;尹永梅;邢玥;徐志环;任琳琳 | 申请(专利权)人: | 南开大学 |
主分类号: | G01N33/82 | 分类号: | G01N33/82 |
代理公司: | 天津佳盟知识产权代理有限公司 12002 | 代理人: | 侯力 |
地址: | 300071*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 维生素 b2 免疫 检测 试剂盒 | ||
1.一种维生素B2的酶联免疫检测试剂盒,其特征是该试剂盒中试剂的组成包括:
A、各孔包被有包被抗原即维生素B2与载体蛋白的偶联物的酶标板1块;
B、维生素B2标准溶液:1ng/mL,5ng/mL,10ng/mL,25ng/mL,50ng/mL,80ng/mL各1瓶;
C、酶标羊抗兔抗体溶液:辣根过氧化酶一羊抗兔IgG原液,使用时用洗涤溶液稀释成1:2000的工作浓度;
D、维生素B2抗体溶液:人工免疫抗原免疫动物制备所得的维生素B2多克隆抗体原液,使用时用洗涤溶液稀释成1:2000工作浓度;
E、发光溶液:使用400μL四甲基联苯胺(TMB)溶液、10mL pH=5.0的柠檬酸缓冲液和2μL体积百分比为30%的H2O2溶液混合而成的显色底物溶液,其中四甲基联苯胺(TMB)溶液由10mg TMB+2mL DMSO混合而成;
F、洗涤溶液:为pH=7.5、浓度为0.1mol/L的磷酸盐缓冲液,其中含有吐温-20的体积分数为0.05%;
G、包被溶液:1.59g碳酸钠和2.53g碳酸氢钠溶于1L水中制成的溶液,调节pH=9.5;
H、封闭溶液:10g卵清蛋白(OVA)溶于1L以上F中所述的洗涤溶液中,再加入质量分数0.05%的NaN3水溶液制成。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述偶联物的载体蛋白为分子量范围是6.7KDa~6.8KDa的牛血清蛋白或卵清蛋白。
3.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:包被酶标板的包被抗原由维生素B2与卵清蛋白偶合制成,制备抗体的人工免疫原由维生素B2与牛血清蛋白偶合制成。
4.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述包被抗原浓度为2μg/mL。
5.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:维生素B2的最大检测范围为1ng/mL~80 ng/mL。
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