[发明专利]复杂天然产物中活性成分筛选方法及应用

权利要求书

1.一种复杂天然产物中活性成分筛选方法，其特征在于，通过以下步骤实现： 

（1）样品并行制备

将待测样品配制成溶液，分别取10-50μL溶液，通过自动进样器或手动进样器注入并行制备系统，所述的并行制备系统由二元液相色谱泵，5根并行连接的色谱柱以及4台馏分收集仪组成，将其中4根色谱柱的洗脱液，采用4台自动馏分收集仪分别收集至4块微孔板，每孔中馏分体积根据微孔板容积确定；

（2）样品分析

　　将上述并行制备系统中剩余1根色谱柱的洗脱液通过管线与紫外/可见光检测器相连，然后再接入电喷雾－质谱仪，对步骤(1)制备的样品进行定性分析；

（3）样品处理

　　通过离心浓缩方法，挥干4块收集有相同馏分的微孔板中的溶液，再加入溶剂溶解后，作为活性评价的待测样品；

（4）活性评价

　　在微孔板上，采用基于细胞、酶或者化学反应的活性评价方法对微孔板中各孔对应的馏分的活性进行评价，筛选其中具有显著活性的馏分； 

（5）活性成分筛选

综合处理液相色谱－质谱联用分析数据和活性评价数据，确定活性馏分在液相色谱－质谱联用分析图谱中的位置，并进一步提取与该馏分相对应的化合物的紫外光谱、分子量、分子碎片等化学信息，推断活性化合物结构，筛选出活性成分。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待测样品为天然产物提取物、中药提取物或含多种化学成分的混合物样品。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（4）所述基于细胞的活性评价方法包括肿瘤细胞的细胞活力测试、损伤的内皮细胞及心肌细胞活力测试，用于评价馏分的抗肿瘤、内皮保护及心肌保护活性；基于酶的活性评价方法包括alpha-葡萄糖苷酶、脂肪酶、酪氨酸酶、乙酰胆碱酯酶等酶活力测，用于评价馏分的酶抑制活性；基于化学反应的活性评价方法包括自由基清除活力测试，用于评价馏分的抗氧化活性。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（5）通过制备纯化目标化合物或购买目标化合物标准品等方式，获取活性成分，再采用活性评价方法验证目标化合物的药效活性。

5.根据权利要求1或2所述的方法在复杂天然产物中筛选活性成分中的应用，所述复杂天然产物包括天然产物提取物、中药提取物或含多种化学成分的混合物。