[发明专利]一种使用四苯乙烯衍生物检测乳制品中酪蛋白的方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物工程和食品安全领域。具体涉及一种酪蛋白的检测方法，尤其涉及一种使用四苯乙烯衍生物检测乳制品中酪蛋白的检测方法。

背景技术

目前牛奶中蛋白质的定量检测方法的原理比较单一，许多年来并没有新的检测方法出现，基本只有凯氏定氮法，双缩脲法，考马斯亮蓝检测等几种标准方法，凯氏定氮是通过测定蛋白样品含量中的氮含量来推算蛋白质的含量。双缩脲蛋白定量是通过蛋白质含的特殊肽键结构与铜离子发生络合反应变色来定量。考马斯亮蓝法是通过考马斯亮蓝分子与蛋白特异性结合变色来定量。这些方法很容易被添加的伪蛋白物质干扰，如氨基酸，明胶，三聚氰胺，尿素等。

而且，现有牛奶蛋白的测定方法容易受到干扰，比如国标中规定的双缩脲蛋白定量方法会受到氨基酸的干扰，凯氏定氮法容易受到三聚氰胺和尿素的干扰，无法得到准确的定量数值。这些检测方法的灵敏度、特异性比较差。灵敏度差无法进行低蛋白含量牛奶和奶制品、乳饮料的检测。特异性差指对所有的蛋白反应相同，无法分别出牛奶中的蛋白与添加的劣质蛋白。

因而，需要一种方法，使用新的原理避免常规干扰物质，与现有方法互补；同时需要更高的灵敏度和特异性来完成比较特殊样品如乳制品的检测。

发明内容

因此，本发明的目的是针对现有技术牛奶蛋白的测定方法易受干扰，灵敏度低，特异性差的不足，提供一种使用四苯乙烯衍生物检测乳制品中酪蛋白的方法，从而能够有效地测定乳制品中酪蛋白的含量，并且灵敏度高，特异性强。

除非特别指明，本文中的“乳制品”是指“奶粉、牛奶或乳饮料”。

针对上述目的，本发明提供的技术方案如下：

一方面，本发明提供一种四苯乙烯衍生物在制备用于检测乳制品中酪蛋白的产品中的应用，所述四苯乙烯衍生物的结构式如下述结构式Ⅰ所示：

式（Ⅰ）

其中，R或R₁选自-H、-XYH、-B(OH)₂、-XYCOOR′、-XYCOOH、-XYNH₂、-XYNHR′、-XYNHR′₂、-XYN⁺R′₃Br^-、-XYOH、-XYSH、-XYSO₃^-M⁺；

R′选自-(CH₂)_nCH₃和-CH₂-C₆H₅；

X为NH，O或没有；

Y为(CH₂)_n;

或XY选自-(OCH₂CH₂)_n和-(OCH₂CH₂CH₂)_n，其中O与四苯乙烯环一侧相连；

M⁺为碱金属离子；

n=0~20。

优选地，n=1~10。

优选地，n=1。

优选地，M⁺为Na⁺或K⁺，还优选地，M⁺为Na⁺。

优选地，所述四苯乙烯衍生物如下述式Ⅱ所示，其简写为BSPOTPE：

式（Ⅱ）。

优选地，所述产品为试剂盒、试剂或药物。

优选地，所述乳制品选自奶粉、牛奶或乳饮料。

优选地，所述奶粉选自全脂奶粉和脱脂奶粉。

优选地，所述牛奶选自脱脂牛奶和全脂牛奶。

优选地，所述乳饮料为无脂乳饮料。

另一方面，本发明提供一种用于检测乳制品中酪蛋白的方法，所述方法是通过使用上述本发明的应用中所述的四苯乙烯衍生物进行的。

优选地，所述方法包括如下步骤：

1）将酪蛋白溶液（酪蛋白溶液为浓度已知的一系列梯度稀释的标准溶液）与上述本发明应用中所述的四苯乙烯衍生物的溶液混合为混合液，制成标准曲线；