[发明专利]一种天然抗氧化剂的检测方法

说明书

一、技术领域

本发明涉及一种天然物质的分析方法，特别涉及食品中天然抗氧化剂的分析方法，具体地说是一种以四氮杂十四环二烯镍配合物[NiL](ClO₄)₂催化的非线性体系对天然抗氧化剂的检测方法。

二、背景技术

随着科技的进步，人们逐渐发现植物中提取的天然抗氧化剂在抗氧化方面起到很好的效果，并将其用于食品，保健，医疗，化妆品生产等领域。抗氧化剂通过干扰自由基链反应中链引发和链增长的过程、消除活性氧来起到抗氧化的作用。人们通常将食品，化妆品或保健品中加入抗氧化剂来保护食品使其免受腐蚀，提高化妆品的保质期或是增强人体的免疫力等。然而，一些人工合成的抗氧化剂对人体具有不同程度的副作用和危害。天然抗氧化剂开始崭露头角，成为食品添加剂，化妆品添加物和保健品添加物的首选。

目前，国内有很多种检测天然抗氧化剂的方法，样品的前处理多以水，乙醇等有机溶剂溶解过滤，再以甲醇、乙腈等萃取对其分离提纯，然后分别用气相色谱（GC），高效液相色谱（HPLC），气相色谱-质谱联用仪（GC-MC）等仪器分析检测食品中的抗氧化剂。这些方法具有操作复杂、成本较高的缺点。

据报道，国外也有使用铈离子或锰离子催化的非线性体系检测抗氧化剂的方法，但其非线性体系存在的寿命短，不够稳定，用来检测时灵敏度不高等问题。

三、发明内容

本发明旨在为天然抗氧化剂提供一种新的检测方法，即以四氮杂十四环二烯镍配合物[NiL](ClO₄)₂催化的非线性体系对天然抗氧化剂的检测方法，本方法是基于该配合物催化的非线性体系（即振荡体系）对天然抗氧化剂的敏锐相应而开发的一种电化学振荡体系—标准曲线（工作曲线）法。具体地说对同一种类的天然抗氧化剂而言，就是将系列不同浓度天然抗氧化剂样本溶液加入到非线性化学体系中，根据样本溶液中天然抗氧化剂的不同浓度与相应的振荡图谱的对应关系建立工作曲线，进而对试样进行定量分析。

对不同种类天然抗氧化剂的定性分析只要比较试样溶液和样本溶液的振荡图谱即可认定。所述的天然抗氧化剂包括抗坏血酸、植酸和芸香叶苷。

本发明所称四氮杂十四环二烯镍配合物是5，7，7，12，14，14-六甲基-1，4，8，11-四氮杂大环-4，11-二烯为配体的四氮杂大环镍（Ⅱ）配合物，有以下化学式，并记作[NiL](ClO₄)₂：

本配合物的结构与生命体里肌红蛋白，血红蛋白，叶绿素和一些酶的关键结构卟啉环很相似，这种以[NiL](ClO₄)₂催化的化学振荡反应和植物和动物细胞体内的生化振荡类似，因此，该体系具有稳定的振幅，较长的振荡寿命，及对抗氧化剂的敏锐响应。

[NiL](ClO₄)₂的制备分两部：1）制备L 2HClO₄，2）再由L 2HClO₄制备[NiL](ClO₄)₂。

1）制备L 2HClO₄：

将98.5mL乙二胺装入一只500mL三颈瓶中，在冰浴条件下，120分钟内搅拌下缓慢滴加126mL70%高氯酸。最初的反应剧烈并伴有白烟产生，所以滴加速度控制在每5秒钟1滴。随着反应进行可以适当加快滴加速度，直到滴加完为止，得到透明的溶液。仍然在冰水浴的条件下，向该透明溶液加入224mL无水丙酮并剧烈搅拌，溶液很快变浑浊同时形成非常粘稠混合物。仍然在冰水浴的条件下保持2-3小时以便充分反应。将所得产物转移到布氏漏斗进行抽滤分离，并用丙酮充分洗涤，可得纯白色固体。将此纯白色固体在热的甲醇-水溶液中重结晶，用硅胶干燥剂真空干燥，得80g白色晶体，此白色晶体为L 2HClO₄。

参考文献：

1.Curtis,N.F.and Hay，R.W.,J.Chem.Soc.,Chem.Commun.,1966,p.534.

2.Gang Hu,Panpan Chen,Wei Wang,Lin Hu,Jimei Song,Lingguang Qiu,Juan Song,

Electrochimica Acta，2007,Vol.52,pp.7996-8002.