[发明专利]一种千山活血膏的质量控制方法

权利要求书

1.一种千山活血膏的质量控制方法，包括采用：(1)薄层色谱法鉴别千山活血膏血竭中血竭素高氯酸盐；(2)薄层色谱法鉴别千山活血膏三七中人参皂苷Rg1；(3)高效液相色谱法测定千山活血膏三七中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1以及三七皂苷R1。

2.根据权利要求1所述的一种千山活血膏的质量控制方法，其特征在于：(1)薄层色谱法鉴别千山活血膏血竭中血竭素高氯酸盐；(2)薄层色谱法鉴别千山活血膏三七中人参皂苷Rg1；(3)高效液相色谱-蒸发光闪射检测法同时测定千山活血膏三七中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1以及三七皂苷R1三种成分的含量。

3.根据权利要求1或2所述的一种千山活血膏的质量控制方法，其特征在于：(1)薄层色谱法鉴别千山活血膏血竭中血竭素高氯酸盐的方法为：取本品5g，加乙醇10ml，超声处理15分钟，放冷，滤过，取滤液，作为供试品溶液。另取血竭对照药材0.1g，加乙醇5ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇(19∶1)为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。

(2)薄层色谱法鉴别千山活血膏三七中人参皂苷Rg1的方法为：取本品10g，加水70ml，加热煮沸30分钟，放冷，滤过，滤液加乙醚30ml振摇提取，弃去乙醚液，水层用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次40ml，合并正丁醇液，用氨试液30ml洗涤，弃去氨液，再用正丁醇饱和的水30ml洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取三七对照药材1g，加甲醇20ml，回流提取1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次25ml，合并正丁醇液，同法制成对照药材溶液；再取人参皂苷Rb1、Rg1及三七皂苷R1对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水(13∶7∶2)10℃以下放置分层的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中。在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点或荧光斑点。

(3)高效液相色谱-蒸发光闪射检测法同时测定千山活血膏三七中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1以及三七皂苷R1三种成分的含量，条件为：

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水为流动相，按下表进行梯度洗脱：

蒸发光闪射检测器条件为：漂移管温度为120℃，载气流速为2.0L/min；理论板数按人参皂苷Rg1峰计算应不低于2000。

对照品溶液的制备：精密称取经五氧化二磷干燥至恒重的人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1对照品适量，加甲醇制成每1ml含人参皂苷Rg10.5mg/ml、人参苷Rb10.5mg/ml、三七皂苷R10.15mg/ml的混合溶液，作为对照品溶液。

供试品溶液的制备：取千山活血膏，除去盖衬，取2.5g精密称定，置索氏提取器中，加乙醚回流提取3小时，弃去乙醚液，药渣挥干，加甲醇回流提取4小时，甲醇提取液蒸干，残渣加水微热使溶解，放冷，上大孔吸附树脂柱(内径1.5cm，长10cm)，用2-4倍柱体积的20％的乙醇溶液洗涤，弃去20％乙醇洗脱液，再用70％的乙醇5-8倍柱体积洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，残渣用甲醇溶解，转移至5ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

测定法分别精密吸取对照品溶液5μl、10μl和供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。