[发明专利]一种鱼腥草地上部分提取物以及鱼腥草地上部分的检测方法有效
申请号: | 201210298974.3 | 申请日: | 2012-08-21 |
公开(公告)号: | CN102809617A | 公开(公告)日: | 2012-12-05 |
发明(设计)人: | 胡思玉;余启波;张德奎;伏思颖;何中燕;王利春;梁隆;程志鹏 | 申请(专利权)人: | 浙江国镜药业有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/36 |
代理公司: | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 | 代理人: | 李高峡;全学荣 |
地址: | 323700 *** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 鱼腥草 地上 部分 提取物 以及 检测 方法 | ||
1.一种鱼腥草地上部分提取物,其特征在于:该提取物的HPLC指纹图谱中的特征如下:有6个特征峰,以槲皮苷色谱峰的保留时间和峰面积为参照,计算其他峰的相对保留时间和相对峰面积,其中,
1号峰:相对保留时间为0.224-0.273,相对峰面积为0.26-1.02;
2号峰:相对保留时间为0.300-0.366,相对峰面积为0.26-1.05;
3号峰:相对保留时间为0.351-0.429,相对峰面积为0.12-0.48;
4号峰:相对保留时间为0.824-0.870,相对峰面积为0.34-1.37;
5号峰:相对保留时间为0.843-0.890,相对峰面积为0.06-0.26;
槲皮苷色谱峰的相对保留时间为1,相对峰面积为1;
上述HPLC指纹图谱的色谱条件如下:
色谱柱:以十八烷基硅烷键合硅胶作填充剂;
检测波长:254±5nm;
流动相:以0.1-0.5%V/V冰醋酸溶液为流动相A,乙腈为流动相B,按如下程序进行梯度洗脱:
从0分钟开始至15分钟,流动相A由95%变为89%,从15分钟开始至45分钟,流动相A由89%变为87%,从45分钟开始至60分钟,流动相A由87%变为65%,从60分钟开始至63分钟,流动相A由65%变为95%。
2.根据权利要求1所述的提取物,其特征在于:所述指纹图谱的特征如下:有6个特征峰,以槲皮苷色谱峰的保留时间和峰面积为参照,计算其他峰的相对保留时间和相对峰面积,其中,
1号峰:相对保留时间0.24-0.25,占参照峰的面积比0.4-0.6;
2号峰:相对保留时间0.33-0.34,占参照峰的面积比0.4-0.6;
3号峰:相对保留时间0.39-0.40,占参照峰的面积比0.2-0.4;
4号峰:相对保留时间0.84-0.85,占参照峰的面积比0.6-0.8;
5号峰:相对保留时间0.86-0.87,占参照峰的面积比0.1-0.2;
槲皮苷色谱峰的相对保留时间为1,相对峰面积为1。
3.根据权利要求2所述的提取物,其特征在于:所述指纹图谱的特征如下:有6个特征峰,以槲皮苷色谱峰的保留时间和峰面积为参照,计算其他峰的相对保留时间和相对峰面积,其中,
1号峰:相对保留时间0.248,占参照峰的面积比0.51;
2号峰:相对保留时间0.333,占参照峰的面积比0.52;
3号峰:相对保留时间0.392,占参照峰的面积比0.24;
4号峰:相对保留时间0.848,占参照峰的面积比0.68;
5号峰:相对保留时间0.867,占参照峰的面积比0.13;
槲皮苷色谱峰的相对保留时间为1,相对峰面积为1。
4.根据权利要求3所述的提取物,其特征在于:所述标准指纹图谱如图4所示。
5.一种鱼腥草地上部分的检测方法,其特征在于:它是采用HPLC指纹图谱法进行检测的,包括如下操作步骤:
(1)供试品溶液的制备:
取鱼腥草地上部分,经水提醇沉后的上清液,除去乙醇后,上非极性或弱极性大孔吸附树脂柱,先用水洗脱至水洗液无色,再用50%~90%V/V乙醇洗脱,收集乙醇洗脱液,除去溶剂后,残渣用50%~90%V/V甲醇溶解,过滤,即得供试品溶液;
(2)色谱条件:
色谱柱:以十八烷基硅烷键合硅胶作填充剂;
检测波长:254±5nm;
流动相:以0.1-0.5%V/V冰醋酸溶液为流动相A,乙腈为流动相B,按如下程序进行梯度洗脱:
从0分钟开始至15分钟,流动相A由95%变为89%,从15分钟开始至45分钟,流动相A由89%变为87%,从45分钟开始至60分钟,流动相A由87%变为65%,从60分钟开始至63分钟,流动相A由65%变为95%;
(3)将供试品溶液所得色谱图与标准指纹图谱进行比对,计算相似度。
6.根据权利要求5所述的鱼腥草地上部分的检测方法,其特征在于:步骤(1)中,所述大孔吸附树脂型号为D101。
7.根据权利要求5所述的鱼腥草地上部分的检测方法,其特征在于:步骤(1)中,洗脱用乙醇的浓度为70%V/V,甲醇浓度为70%V/V。
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