[发明专利]H5N1亚型禽流感病毒反转录环介导的体外等温扩增检测方法和试剂盒有效
申请号: | 201210298698.0 | 申请日: | 2012-08-21 |
公开(公告)号: | CN103290140A | 公开(公告)日: | 2013-09-11 |
发明(设计)人: | 秦智锋;孙洁;卢体康;曾少灵;林庆燕;吕建强;杨俊兴;刘建利;花群义;廖立珊 | 申请(专利权)人: | 秦智锋 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93 |
代理公司: | 广州新诺专利商标事务所有限公司 44100 | 代理人: | 刘杉;刘菁菁 |
地址: | 518033 广东省深圳*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | sub 禽流感 病毒 转录 环介导 体外 等温 扩增 检测 方法 试剂盒 | ||
1.H5N1亚型禽流感病毒的检测试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包括一对外引物、一对内引物及一对环引物,
所述一对外引物为分别具有Seq ID No.1所示序列的前外引物F3和具有Seq ID No.2所示序列的后外引物B3,
所述一对内引物包括前内引物FIP和后内引物BIP,所述前内引物FIP含有Seq ID No.3和Seq ID No.4所示的序列,Seq ID No.3和Seq ID No.4之间通过0~4个碱基相连;所述后内引物BIP含有Seq ID No.5和Seq ID No.6所示的序列,Seq ID No.5和Seq ID No.6之间通过0~4个碱基相连,
所述一对环引物为分别具有Seq ID No.7所示序列的环引物FLOOP和具有Seq ID No.8所示序列的环引物BLOOP,
Seq ID No.1:5’---TGGKTGTTTYGARTTCTAYCACAA---3’
Seq ID No.2:5’---AGAAACAAGGGTGTTTTTAAYTAYAATCTG---3’
Seq ID No.3:5’---TATTTCCTCYCTGTTTAGYCTTGMTTCT---3’
Seq ID No.4:5’---GTGACAATGAATGYATGGAAAGTGT---3’
Seq ID No.5:5’---GTGGCGAGTTCCCTAGCACTGG---3’
Seq ID No.6:5’---CTCACAAWTYTAGATGCAAATTCTGC---3’
Seq ID No.7:5’---TCTGARTAYTGYGGATAGTCATACGTTCC---3’
Seq ID No.8:5’---GGTAGCTGGTCTRTCTTTTTGGATGTG---3’。
2.根据权利要求1所述的检测试剂盒,其特征在于:所述前内引物FIP的Seq ID No.3和Seq ID No.4之间直接相连,序列为:
TATTTCCTCYCTGTTTAGYCTTGMTTCT-GTGACAATGAATGYATG GAAAGTGT
所述后内引物BIP的Seq ID No.5和Seq ID No.6之间直接相连,序列为:
GTGGCGAGTTCCCTAGCACTGG-CTCACAAWTYTAGATGCAAATTCTGC。
3.根据权利要求1所述的检测试剂盒,其特征在于:所述前内引物FIP的Seq ID No.3和Seq ID No.4之间通过TTTT这4个碱基相连。
4.根据权利要求1所述的检测试剂盒,其特征在于:所述后内引物BIP的Seq ID No.5和Seq ID No.6之间通过TTTT这4个碱基相连。
5.根据权利要求1所述的检测试剂盒,其特征在于:所述试剂盒的反应体系总体积为25μL,含有
。
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