[发明专利]三步酶解法生产饲用酿酒酵母破壁细胞

说明书

技术领域

本发明涉及一种饲用破壁酵母细胞的制备方法。 

技术背景

酵母菌可以将劣质蛋白转化为优质蛋白，为动物提供优质的蛋白饲料，同时，酵母细胞壁细胞含有大量酵母蛋白、酵母核酸，酵母甾体等营养物质，具有调节免疫，提高动物抗病力，减少抗生素的使用，是优良的绿色的饲料添加剂。酵母细胞壁的破碎主要通过有机械法、化学法及酶法，但酶法应用较少，这是因为单一酶法裂解效果较差。而机械法噪音较大，而化学法产生大量污水，容易导致化学药品在饲料中的残留。 

本方法是用农业部批准可用于饲料添加剂的酿酒酵母为发酵菌种，通过高密度发酵，得到大量优质酵母活菌。酵母细胞壁主要由外层的甘露聚糖，中层的葡聚糖组成交联的多糖结构故而造成难以破壁。本方法先用β-甘露聚糖酶破坏其外层细胞壁，然后用β-葡聚糖破坏其中层细胞壁，最终通过蛋白酶酶解细胞壁及细胞膜蛋白，从而达到裂解蛋白，释放胞内营养物质，提高营养利用率，本方法都是在温和的条件下生产，不需要剧烈反应，故不会造成噪音。 

发明内容

本发明目的在于针对当前抗生素的滥用而发明的抗生素替代物，本产品无残留，无毒害，是绿色的健康的新型饲料添加剂。 

本发明提供一种用于微生态制剂的制备方法，其包括如下步骤： 

1.本发明提供一种用于饲用合生素的制备方法，其包括如下步骤： 

1)配制种子培养基1000ml，121℃灭菌15分钟； 

2)将菌种接种于种子培养基，摇动培养18小时； 

3)配制酿酒酵母发酵培养基，121℃灭菌15分钟； 

4)将2)培养得到的种子加入0.5吨发酵罐中，发酵约24小时； 

5)发酵结束后，转鼓过滤，得到酿酒酵母菌泥，用磷酸缓冲液洗涤并配制成酵母悬液。 

6)在反应釜中，用NaOH和醋酸调节PH值为6.0，加入β甘露聚糖酶100U/ml，处理2小时。 

7)调节PH值为6.5，加入β-葡聚糖酶200U/ml，处理2小时。 

8)调节PH值为7.0，加入中性蛋白酶1000U/ml，处理3小时。 

9)喷雾干燥，得到饲用酿酒酵母破壁细胞。 

下面对本发明的技术内容做进一步说明。 

1)种子培养基为YPD，其成分为蛋白胨1％，葡萄糖2％，酵母膏0.5％，氯化钠0.5％ 

2)酿酒酵母菌发酵培养基成分如下： 

3)在发酵过程中，补氨水使pH值保持7.0左右。 

  原料   比例   糖蜜   4％   淀粉   2％   蛋白胨   1％   硫酸铵   1％   硫酸镁   0.01％   磷酸氢二钾   0.2％

发酵终止后，酵母菌活菌数为10⁸CFU/ml，破壁后，其成分为酵母细胞壁、酵母。多糖、酵母蛋白、酵母核酸、甾体等，提高免疫，减少疾病，降低腹泻。 

本制剂可在仔猪、生长育肥猪、家禽中应用，其用量如下表，也可以加入代乳料中：