[发明专利]短小芽孢杆菌LD-b1的发酵工艺及其在防治植物病害中的应用

权利要求书

1.一株防治植物病害的云雾龙胆内生菌，为革兰氏阳性的短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)，菌株代号为LD-b1，该菌株于2012年5月14日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.6112。

2.防治植物病害的生防剂，包括短小芽孢杆菌LD-b1或从其来源的拮抗活性物质作为有效成分。

3.权利要求2所述的生防剂，其中植物病害包括黄瓜褐斑病、黄瓜灰霉病、黄瓜菌核病、苹果腐烂病、茄子枯萎病、小麦赤霉病、白菜黑斑病和番茄灰霉病。

4.短小芽孢杆菌LD-b1的培养基配方：

种子培养基(g/L)：蔗糖15，蛋白胨5，酵母粉0.2，磷酸氢二钾0.5，硫酸镁0.05，氯化钠0.1，pH7.5，121℃灭菌30min。

发酵培养基(g/L)：蔗糖25，豆饼粉3，硫酸铵2.5，酵母粉0.2，磷酸氢二铵0.8，硫酸镁0.05，硫酸亚铁0.02，氯化钠0.1，pH7.5，121℃灭菌30min。

5.短小芽孢杆菌LD-b1的种子罐培养条件：

装液量70％，接种量5％，发酵温度30℃，通气量1∶1，罐压0.2kg/cm²，搅拌转速200～600r/min，溶氧10％以上，发酵时间24小时。

6.短小芽孢杆菌LD-b1的发酵罐培养条件：

装液量70％，接种量5％，发酵温度30℃，通气量1∶1，罐压0.2kg/cm²，搅拌转速100～300r/min，溶氧5％以上，发酵30小时和45小时分别补加10g/L蔗糖两次，发酵时间68小时。