[发明专利]一种提高辣椒疫霉卵孢子产量及促进卵孢子萌发的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种提高辣椒疫霉卵孢子产量及促进卵孢子萌发的方法。

背景技术

由辣椒疫霉引起的辣椒疫病以及番茄和南瓜等茄科和葫芦科作物上的疫病目前在亚洲、美洲、欧洲和澳洲普遍发生，在我国大部分省市也都有发生。由于辣椒疫病蔓延迅速，对寄主植物破坏性强，从苗期到结果期都可发病，严重危害了植株茎秆、叶片及果实并最终导致死苗和烂果乃至绝收，加之对于此类病害缺少抗病品种以及有效的农业栽培管理措施等原因，导致其危害逐渐加重并难以控制，目前已成为我国蔬菜生产中的重要病害。

辣椒疫霉属于异宗配合病原卵菌，存在A₁、A₂两种交配型，在田间可发生有性生殖产生卵孢子。辣椒疫霉的卵孢子是由有性世代产生的具有厚壁的一种休眠有性孢子，在自然界中可以抵抗不良环境，是辣椒疫霉越冬的主要方式。自然条件下，辣椒疫霉卵孢子形成后通常需要经过一段时间的休眠才能陆续萌发，但是在室内条件下，一些野生型菌株或诱导获得的突变体菌株卵孢子产生量少、萌发率低，给疫霉菌遗传学等相关研究带来了困难。遗传分析研究要求辣椒疫霉在室内培养条件下可以快速产生大量卵孢子，并能够同时萌发，以缩短试验周期并保障研究结果的准确性。

对于疫霉卵孢子产生以及萌发的研究也有相关报道，但是同属不同种的疫霉菌株其卵孢子产生及萌发所需条件不同，且目前主要集中于对致病疫霉、苎麻疫霉、大豆疫霉、恶疫霉等卵孢子的产生以及萌发条件的研究，关于辣椒疫霉卵孢子的研究国内未见报道。建立一种简易、高效的诱导辣椒疫霉卵孢子大量产生及萌发的方法，是本领域亟待解决的一个技术问题，也为辣椒疫霉遗传学相关研究奠定了基础。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种提高辣椒疫霉卵孢子产量的方法。

本发明所提供的提高辣椒疫霉卵孢子产量的方法，包括如下步骤：用10%V₈蔬菜汁培养基培养辣椒疫霉菌株，培养条件为黑暗。

上述过程中，所述培养的时间为15天-60天，具体为45天-60天；所述培养的温度为25℃-28℃，具体为25℃。

本发明的另一个目的是提供一种促进辣椒疫霉卵孢子萌发的方法。

本发明所提供的促进辣椒疫霉卵孢子萌发的方法，包括如下步骤：

（1）将辣椒疫霉卵孢子在黑暗条件下培养15-45天；

（2）用质量百分含量为0.05%—0.25%的高锰酸钾处理步骤（1）所得卵孢子；

（3）将步骤（2）所得卵孢子在16h日光灯/8h黑光灯交替照射的条件下培养。

上述过程中，所述步骤（1）中，培养的时间为15天、30天或45天；

所述步骤（2）中，所述高锰酸钾的质量百分含量为0.1%—0.25%。

上述过程中，所述步骤（2）中，所述高锰酸钾的质量百分含量为0.1%或0.25%；

上述过程中，所述步骤（2）中，所述处理的方法为：将所述卵孢子制成悬浮液，向悬浮液中加入高锰酸钾，超声处理20-40s。

上述过程中，超声处理的时间具体为30s，超声的功率为250W，工作频率为40KHz。

上述过程中，所述步骤（3）中，培养的时间为5天。

上述过程中，所述步骤（3）中，所述培养中使用的培养基是S+L培养基。具体制备方法为：卵磷脂0.1g，基础培养液10ml[MgSO₄·7H₂O 100mg，(NH₄)SO₄ 100mg，K₂HPO₄ 60mg，CaCl₂·2H₂O 30mg，KH₂PO₄ 30mg，ZnSO₄·7H₂O 3mg，蒸馏水100ml]，葡萄糖0.04g，琼脂粉14g，蒸馏水定容至1L。

上述过程中，步骤1）中，培养所用的培养基为10%V₈蔬菜汁培养基。

上述过程中，所述步骤（1）和步骤（3）中，温度为25℃-28℃，具体为25℃。

上述过程中，在所述步骤（1）之前，包括如下步骤：用权利要求1或2所述方法制备辣椒疫霉卵孢子。