[发明专利]一种多溴联苯同系物免疫原及其制备方法

权利要求书

1.一种多溴联苯同系物免疫原，其特征在于，该免疫原的结构式如下：

2.一种如权利要求1所述的多溴联苯同系物免疫原的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

(1)PBB28半抗原4-(4，4′-二溴联苯基)-4氧-丁酸的合成：

将丁二酸酐、4，4’-二溴联苯溶解于非质子性溶剂中，冰浴搅拌，无水三氯化铝在冰水浴条件下投料，在1-2h内分次加入，无水三氯化铝加完后撤去冰水浴，在常温条件下，隔水密封搅拌10-14h后加稀盐酸终止反应后，有机层用稀盐酸水洗除去杂质，旋转蒸发除去有机溶剂，得黄色固体粉末粗品，重结晶，干燥，得到PBB28半抗原4-(4，4′-二溴联苯基)-4氧-丁酸；

(2)PBB28人工免疫原PBB28-BSA的制备：

在0-5℃的条件下，将溶有N-羟基琥珀酰亚胺和N，N′-二环己基碳酰亚胺的有机溶液逐滴加入溶有PBB28半抗原的有机溶液中，搅拌反应6-12h，4℃过夜，将离心分出的上层活化酯加入到pH为6.8-7.4，溶有牛血清白蛋白(BSA)的磷酸盐缓冲溶液中，0-4℃的冰浴中搅拌反应4-6h得到上清液，将上清液转移到半透膜中，在pH为6.8-7.4的磷酸盐缓冲溶液或0.9％生理盐水透析5天，离心分出上清液，即得PBB28人工免疫原PBB-BSA偶联物，经柱提纯，加入等量甘油-20℃下保存或者冻干保存。

3.根据权利要求2所述的多溴联苯同系物免疫原的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述的非质子性有机溶剂为二氯甲烷或硝基苯。

4.根据权利要求2所述的多溴联苯同系物免疫原的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述的4，4’-二溴联苯、丁二酸酐和无水AlCl₃的摩尔比为1∶1-2∶1-2.5。

5.根据权利要求2所述的多溴联苯同系物免疫原的制备方法，其特征在于，步骤(1)采用体积比为1∶1甲醇和乙醚组成的混合溶液进行重结晶。

6.根据权利要求2所述的多溴联苯同系物免疫原的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述的有机溶液中采用的溶剂为N’N-二甲基甲酰胺或二甲基亚砜。

7.根据权利要求2所述的多溴联苯同系物免疫原的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述的PBB28半抗原、N-羟基琥珀酰亚胺、N，N′-二环己基碳酰亚胺与牛血清白蛋白的摩尔比为1∶1-4∶1-4∶0.005-0.05。