[发明专利]一种真菌发酵生产恩镰孢菌素类化合物的方法

权利要求书

1.一种利用镰孢菌属（Fusarium）真菌固体发酵生产恩镰孢菌素类化合物（Enniatins）的方法，包括以下步骤：

步骤一：固体发酵培养

菌种：镰孢菌属产恩镰孢菌素类化合物的真菌（可以是从其寄主中分离纯化得到，也可以从菌种保藏中心等机构获得)；

培养基组成：0～5重量份的蛋白胨、500～1500重量份的水、1000重量份的大豆，PH值为5～8；

接种量：将生长好的菌种按质量百分比1%～20%的比例接种；

普通发酵培养条件：于16～32℃，光照培养或暗培养或明暗交替培养，培养周期为4～24天；

发酵罐中的条件：罐压0.05MPa，通气量0.6～1.2vvm，发酵时间5-10天；

步骤二：目标产物的分离纯化

发酵物的预处理：采用1～30倍体积的乙酸乙酯提取，收集溶剂部分；回收溶剂后得干膏；

分离工艺：将所得干膏溶散到体积比为20%～80%醇/水中，以0.5～20倍体积的正已烷萃取，收集正已烷部位，回收溶剂，经干燥得灰白色粉末状粗提物；

纯化工艺：以适当的溶剂溶解上述粗提物，采用无机基质为填料的色谱柱，以反相流动相冲柱，收集恩镰孢菌素洗脱部分，干燥后即得到恩镰孢菌素类化合物干粉。

2.根据权利要求1所述的利用镰孢菌属（Fusarium）真菌固体发酵生产恩镰孢菌素类化合物（Enniatins）的方法，其特征在于，培养基组成中的大豆可以是其它豆类或豆类的加工品，蛋白胨也可以替换为氨基酸。

3.如权利要求1所述的利用镰孢菌属（Fusarium）真菌固体发酵生产恩镰孢菌素类化合物（Enniatins）的方法，其特征在于，在分离工艺中，是将所得干膏溶散到醇/水（体积比1：1）中。

4.如权利要求1所述的利用镰孢菌属（Fusarium）真菌固体发酵生产恩镰孢菌素类化合物（Enniatins）的方法，其特征在于，所述的无机基质为填料的色谱柱是反相色谱柱。

5.根据权利要求1所述的利用镰孢菌属（Fusarium）真菌固体发酵生产恩镰孢菌素类化合物（Enniatins）的方法，其特征在于，所述的镰孢菌属产恩镰孢菌素类化合物的真菌是镰孢菌属真菌三线镰刀菌(Fusarfumtricinctum)。

6.根据权利要求5所述的利用镰孢菌属（Fusarium）真菌固体发酵生产恩镰孢菌素类化合物（Enniatins）的方法，其特征在于，所述的三线镰刀菌(Fusarfumtricinctum)购自中国典型培养物保藏中心，其菌株保藏编号为CCTCCAF 93240。