[发明专利]一种猪用亚洲I型口蹄疫病毒灭活疫苗佐剂及制备方法有效
申请号: | 201210274528.9 | 申请日: | 2012-08-03 |
公开(公告)号: | CN102764435A | 公开(公告)日: | 2012-11-07 |
发明(设计)人: | 景志忠;陈国华;曾爽;房永祥;贾怀杰;何小兵;蔺国珍;才学鹏 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
主分类号: | A61K39/39 | 分类号: | A61K39/39;A61K39/135;A61P31/14 |
代理公司: | 兰州振华专利代理有限责任公司 62102 | 代理人: | 张晋 |
地址: | 730046 甘肃*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 种猪 亚洲 口蹄疫病毒 疫苗 佐剂 制备 方法 | ||
1. 一种猪用亚洲I型口蹄疫病毒灭活疫苗佐剂,这种佐剂中有重组猪白介素2,其特征在于这种佐剂是由重组猪白介素2被一种脂质基质和乳化剂包裹构成的粒径为300-500nm的脂质纳米颗粒。
2.根据权利要求1所述的猪用亚洲I型口蹄疫病毒灭活疫苗佐剂,其特征在于所述的乳化剂为聚乙丙交脂及少量的聚乙烯醇,所述的脂质基质是氢化蓖麻油,所用的重组猪白介素2为酵母系统表达的重组蛋白。
3.根据权利要求2所述的猪用亚洲I型口蹄疫病毒灭活疫苗佐剂,其特征在于佐剂由10重量份的氢化蓖麻油和2重量份的聚乙丙交脂包裹0.5-1重量份的重组猪白介素2。
4.权利要求1或2或3所述的佐剂用于亚洲I型口蹄疫病毒灭活抗原混合物构成的亚洲I型口蹄疫病毒灭活疫苗。
5.权利要求1或2或3所述的佐剂的制备方法,其特征在于采用复乳溶剂挥发法制备。
6.权利要求5所述的制备方法,其特征在于将100mg的氢化蓖麻油和20mg的聚乙丙交脂溶于1mL的三氯甲烷中作为有机相,将该有机相加热到30-40℃;纯化后的pIL-2蛋白溶于pH=8的磷酸缓冲液中,使终浓度为20mg-50mg/ml;取200μL的前述液体为水相,然后在充分搅拌条件下把水相缓慢加入到前述的有机相中,冰浴中超声形成(w/o)相的乳液,将制备的乳液加入到5mL的质量百分比为1%的聚乙烯醇水溶液中,进一步乳化形成(w/o/w)相的乳液,再在室温下充分搅拌,使有机溶剂完全挥发,固化得到聚合物纳米粒分散体系,加入5-10倍体积的灭菌水收集纳米粒,并用3~5mL的蒸馏水重悬,冷冻干燥获得所要的佐剂。
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