[发明专利]一种去除疫苗中宿主DNA的方法在审
申请号: | 201210263908.2 | 申请日: | 2012-07-27 |
公开(公告)号: | CN103571800A | 公开(公告)日: | 2014-02-12 |
发明(设计)人: | 杜笑寒;周童;贾芳苗;戚凤春;何荣 | 申请(专利权)人: | 江苏先声药物研究有限公司;江苏先声卫科生物制药有限公司 |
主分类号: | C12N7/02 | 分类号: | C12N7/02 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 冯琼;姜义民 |
地址: | 210042 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 去除 疫苗 宿主 dna 方法 | ||
1.一种去除疫苗中宿主DNA的方法,包括以下步骤:
步骤1)调整病毒感染的宿主细胞上清浓缩液的pH值和盐浓度,使pH值在6~8之间,盐浓度在0.2~0.5mol/L之间;
步骤2)使调整后的宿主细胞上清浓缩液与阴离子交换介质充分接触。
2.根据权利要求1的方法,所述盐浓度为在0.3~0.5mol/L之间。
3.根据权利要求1的方法,所述上清浓缩液的pH值选自7-8或7-7.8。
4.根据权利要求1-3任一项所述的方法,所述阴离子交换色谱介质选自偶联二乙胺基乙基或者季铵盐为配基的琼脂糖微球。
5.根据权利要求1的方法,所述宿主细胞选自Vero细胞或CHO细胞。
6.根据权利要求1的方法,所述疫苗选自狂犬疫苗、脊髓灰质炎疫苗、乙脑疫苗、甲肝疫苗、出血热疫苗、流感疫苗、SARS疫苗或轮状病毒疫苗。
7.根据权利要求1的方法,步骤2)之后还包含核酸内切酶处理步骤。
8.根据权利要求7中所述的方法,所述核酸内切酶为Benzonase。
9.根据权利要求7或8所述的方法,酶切处理后的病毒液经过凝胶过滤层析纯化。
10.根据权利要求9的方法,所述凝胶过滤介质是4-6%交联度的琼脂糖微球。
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