[发明专利]一种5'-核糖核苷酸水解酶检测试剂盒及其制备方法有效

专利信息
申请号: 201210261802.9 申请日: 2012-07-27
公开(公告)号: CN102747134A 公开(公告)日: 2012-10-24
发明(设计)人: 张雷 申请(专利权)人: 北京恩济和生物科技有限公司
主分类号: C12Q1/44 分类号: C12Q1/44;C12Q1/34;C12Q1/28;C12Q1/26
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 100083 北京市*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 核糖 核苷酸 水解 检测 试剂盒 及其 制备 方法
【权利要求书】:

1.一种5’-核糖核苷酸水解酶检测试剂盒,其组成为:

甘氨酸缓冲液、显色剂、嘌呤核苷磷酸化酶、黄嘌呤氧化酶、过氧化物酶、5’-次黄嘌呤核苷酸、4-氨基安替比林溶液。

2.权利要求1的试剂盒,其特征在于:

甘氨酸缓冲液为15-45mM甘氨酸,0.05%吐温-20, 10mM乙二胺四乙酸二钠,0.05%硫柳汞,0.4M NaCl,pH6.5-10;

显色剂为含有20mM 3-甲基-N,N-二丙磺酸钠苯胺的磷酸盐缓冲液;

4-氨基安替比林溶液为含有20-30mM 4-氨基安替比林的氯仿溶液。

3.上述试剂盒的制备和操作方法,主要步骤为:

(a)按下列比例配制好试剂:

甘氨酸缓冲液                80mmol/L

显色剂                      10mmol/L

嘌呤核苷磷酸化酶           0.5-1KU/L

黄嘌呤氧化酶                   0.8-1KU/L

过氧化物酶                 0.6-1KU/L

5’-次黄嘌呤核苷酸          30mmol/L

4-氨基安替比林溶液           10mmol/L

(b)将试剂与待测样本按一定比例混合,使其完全反应;

(c)用半/全自动生化分析仪测定吸光度变化值;

(d)根据吸光度变化值计算出样本中5’-核糖核苷酸水解酶的浓度。

4.权利要求3的方法,其特征在于,被测样品与试剂比例应控制在1:45到1:60之间。

5.权利要求3的方法,其特征在于,反应温度为37(±1)℃。

6.权利要求3的方法,其特征在于,反应时间为10-15分钟。

7.权利要求3的方法,其特征在于,用半/全自动生化分析仪检测的主波长为550nm,副波长为700 nm。

8.权利要求3的方法,其特征在于,试剂可配置成单试剂、双试剂或三试剂。

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