[发明专利]一种基质表达T.fusca角质酶的方法有效
| 申请号： | 201210241426.7 | 申请日： | 2012-07-05 |
| 公开（公告）号： | CN102899298A | 公开（公告）日： | 2013-01-30 |
| 发明（设计）人： | 吴敬;宿玲恰;陈晟;陈坚 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/16 | 分类号： | C12N9/16;C12N15/70;C12R1/19 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基质 表达 fusca 角质 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种基质表达T.fusca角质酶的方法，其特征在于，将NCBI编号为AAZ54921的T.fusca角质酶成熟蛋白基因在大肠杆菌中表达，发酵培养并收集发酵上清液。
2.权利要求1所述的方法，其特征在于，具体方法为：
1)将T.fusca角质酶成熟蛋白基因克隆到pET-20b(+)，构建无信号肽角质酶的重组质粒Tfu_0883/pET-20b(+)NS；
2)将重组质粒Tfu_0883/pET-20b(+)NS导入宿主大肠杆菌；
3)步骤2)构建的无信号肽角质酶重组菌进行发酵，收集发酵上清液。
3.权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述宿主大肠杆菌为E.coli BL21(DE3)、E.coli W3110、E.coli JM109、E.coli JM109(DE3)、E.coli DH5α等中任意一种。
4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于所述携带角质酶的载体为pUC系列，pET系列，pT7-7，或pGEX等中的任意一种。
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