[发明专利]一种平消片有效成分含量测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及医药领域，尤其是涉及有效成分的含量测定方法。

背景技术

现有中成药平消片，是一种常用抗肿瘤中成药。在药典及部颁标准记载的平消片的【含量测定】取本品30片，除去包衣，精密称定，研细，取粉末约4g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，精密加入氯仿20ml与浓氨溶液1ml，密塞，称定重量，冷浸48小时，或超声提取40分钟，称重，用氯仿补足损失的重量，充分振摇，滤过，精密量取滤液10ml，置分液漏斗中，以硫酸溶液(0.5mol/L)提取4次，每次10ml，提取液均以硫酸溶液(0.5mol/L)预先湿润的滤纸滤入50ml量瓶中，并以硫酸溶液(0.5mol/L)适量洗涤滤器，洗液并入量瓶中，再加硫酸溶液(0.5mol/L)至刻度，摇匀，精密量取10ml，置50ml量瓶中，加硫酸液(0.5mol/L)至刻度，摇匀照分光光度法，在262nm及300nm波长处测定吸收度，平均片重本品每片含马钱子以士的宁(C₁₂H₂₂N₂O₂)计，应为0.25～0.35mg。

平消片处方为郁金54g仙鹤草54g五灵脂45g白矾54g硝石54g干漆(制)18g枳壳(麸炒)90g马钱子粉36g，枳壳的含量最多，是最主要的组分，上述药典中含量测定方法只测定马钱子中士的宁的含量，不能真实反映产品的质量，以至于产品的稳定性无法控制，给生产及患者带来隐患。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种平消片有效成分的含量测定方法，该方法准确、可靠、能够真实反映产品的质量。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种平消片中有效成分的含量测定方法，包括如下步骤：

(1)对照品的制备：取柚皮苷、新橙皮苷对照品适量；

(2)供试品的制备：取样品用甲醇或乙醇提取后至于容量瓶中备用；

(3)高效液相色谱条件：C₁₈4.6×250mm，5μm色谱柱、流动相乙腈-水、流速0.5-1.2ml·min^-1检测波长245-360nm；

(4)测定法：精密吸取对照品及供试品溶液注入液相色谱仪即得。

上述步骤(1)所述柚皮苷对照品浓度为80ug/1ml，新橙皮苷对照品浓度60ug/1ml。上述步骤(2)中所述的供试品用甲醇超声提取后至于容量瓶中备用。优选步骤(2)中所述的供试品加入甲醇25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液5ml，置25ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

上述步骤(3)中流动相的pH值为2.0-5.0，流动相乙腈-水15-30∶85-70.所述流动相用酸调节pH值，优选为pH值3.0，流动相乙腈-水＝20∶80；所述的酸包括但不限于为磷酸、醋酸、甲酸、柠檬酸、酒石酸、硫酸氢纳、硫酸氢钾、盐酸、硫酸、碳酸、高氯酸、苹果酸、枸椽酸、水杨酸、咖啡酸等，优选磷酸、醋酸、甲酸、柠檬酸、酒石酸、硫酸氢纳、硫酸氢钾等，最佳为磷酸。所述磷酸浓度为5-20％，优选浓度为10％。本发明中优选10％磷酸能够使平消片中各色谱峰有很好的分离，改善峰拖尾现象。

上述步骤(3)中所述的优选流动相乙腈-水＝20∶80，流速为1.0ml·min^-1，检测波长283nm

上述步骤(4)中所述测定，优选柚皮苷含量不低于2.26mg/片，新橙皮苷含量不低于1.33mg/片。

本发明最佳的平消片有效成分含量测定方法，包括如下步骤：

(1)对照品的制备：精密称取柚皮苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含柚皮苷80ug的溶液；精密称取新橙皮苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含新橙皮苷60ug的溶液；

(2)取本品20片，置研钵中研细过四号筛，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液5ml，置25ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；

(3)高效液相色谱条件

色谱柱：WatersC₁₈柱4.6×250mm，5μm，流动相：乙腈-水＝20∶80，用10％磷酸调节PH值3.0；检测波长为283nm；柱温：室温；流速：1.0ml·min^-1；进样方式：自动进样；

(4)测定法