[发明专利]一种新的松材线虫检测试剂盒及其检测方法无效
| 申请号： | 201210231555.8 | 申请日： | 2012-07-06 |
| 公开（公告）号： | CN102925545A | 公开（公告）日： | 2013-02-13 |
| 发明（设计）人： | 张裕君;郑文杰;贺艳;王金成;廖芳 | 申请（专利权）人： | 天津出入境检验检疫局动植物与食品检测中心 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 300461 天津市*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 松材线虫 检测 试剂盒 及其 方法 | ||
1.一种用于松材线虫检测的特异性引物和竞争性引物，其特征在于，序列为：
上游引物Bx-F3-bio：5’Biotin-TCTGCACGTTGTGACAGTC-3’
下游引物Bx-B3-fit：5’Fitc-TCATCCGAACGTCCCTGAC-3’
竞争引物Bx-B3-comp：5’-GTCAGGGACGTTCGGAACT-3’
2.一种用于检测松材线虫的试剂盒其特征在于，包括如下成分：
(1)阳性对照松材线虫DNA模板和阴性对照拟松材线虫DNA模板
(2)松材线虫上下游引物和竞争引物
上游引物Bx-F3-bio：5’Biotin-TCTGCACGTTGTGACAGTC-3’
下游引物Bx-B3-fit：5’Fitc-TCATCCGAACGTCCCTGAC-3’
竞争引物Bx-B3-comp：5’-GTCAGGGACGTTCGGAACT-3’
(3)10×ExTaq PCR Buffer，ddH2O，2.5mM dNTP，5U/μl ExTaq酶
(4)生物素(Biotin)、荧光素(Fitc)抗原标记的薄膜层析试纸条。
3.一种松材线虫的快速检测方法，包括如下步骤：
(3)PCR反应条件：94℃预变性1min，94℃变性30s，57℃退火30s，72℃延伸30s，30个循环，72℃延伸5min。
(4)判定结果：PCR产物用试纸条检测，若控制线正常，检测线呈现阳性，则说明该样品含有松材线虫，若呈现阴性，则说明该样品中不含有松材线虫。
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