[发明专利]一种维生素B12复合发酵助剂及其在维生素B12发酵中的应用方法

权利要求书

1.一种维生素B₁₂复合发酵助剂，其特征在于包含以下质量百分比的组分：90～98%的甜菜碱、0.15～0.55%的复合维生素和1.45～9.85%的复合氨基酸；所述复合维生素包含质量百分比30～55%的硫胺素、10～25%的盐酸吡哆醇和40～55%的叶酸；所述复合氨基酸包含质量百分比5～10%的赖氨酸、10～15%的丝氨酸、10～15%的谷氨酸、30～35%的天冬酰胺和30～40%的天冬氨酸。

2.如权利要求1所述的维生素B₁₂复合发酵助剂，其特征在于：所述甜菜碱包括无水甜菜碱、一水甜菜碱、盐酸盐甜菜碱、磷酸盐甜菜碱、磺酸甜菜碱的一种或一种以上的混合物。

3.如权利要求1所述的维生素B₁₂复合发酵助剂，其特征在于：所述甜菜碱中残胺的含量为0.001～0.1wt%。

4.如权利要求1所述的维生素B₁₂复合发酵助剂在维生素B₁₂发酵中的应用方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）种子培养：将种子培养基灭菌之后，接种入脱氮假单胞菌菌悬液，于28～32℃振荡培养至种子液中菌体的光密度值OD₇₀₀达到10～15；

（2）发酵培养：将发酵培养基于115℃灭菌20分钟，将所述维生素B₁₂复合发酵助剂按照1.0～2.0wt%的添加量加入到发酵培养基中，然后按照5～10%的接种量接种入所述种子液，于28～32℃进行有氧发酵培养，发酵过程中补加所述维生素B₁₂复合发酵助剂，维持甜菜碱的含量为0.15～0.35g/dl，发酵时间1～7天。

5.如权利要求4所述的维生素B₁₂复合发酵助剂在维生素B₁₂发酵中的应用方法，其特征在于所述种子培养基配方为：蔗糖3.0～5.0g/dl、玉米浆1.0～3.0g/dl、硫酸铵0.1～0.2g/dl、磷酸氢二铵0.1～0.3g/dl、硫酸锰0.07～0.09g/dl、氯化钴0.001～0.003g/dl、氧化镁0.01～0.03g/dl、5,6～二甲基苯并咪唑0.0005～0.0015g/dl、硫酸锌0.0005～0.0015g/dl和碳酸钙0.1～0.2g/dl，所述种子培养基的pH为7.2～7.5。

6.如权利要求4所述的维生素B₁₂复合发酵助剂在维生素B₁₂发酵中的应用方法，其特征在于所述发酵培养基配方为：蔗糖7.0～8.0g/dl、玉米浆6.0～7.0g/dl、硫酸铵0.05～0.1g/dl、磷酸二氢钾0.04～0.07g/dl、氯化钴0.006～0.008g/dl、氧化镁0.04～0.05g/dl、5,6～二甲基苯并咪唑0.004～0.006g/dl、硫酸锌0.005～0.008g/dl和碳酸钙0.05～0.12g/dl；所述发酵培养基的pH为7.0～7.5。

7.如权利要求4、5或6所述的维生素B₁₂复合发酵助剂在维生素B₁₂发酵中的应用方法，其特征在于：所述甜菜碱包括无水甜菜碱、一水甜菜碱、盐酸盐甜菜碱、磷酸盐甜菜碱、磺酸甜菜碱的一种或一种以上的混合物。