[发明专利]一种高效表达Hst 5的重组工程菌及构建方法和应用

权利要求书

1.一种高效表达Hst5的重组工程菌，其特征在于：所述重组工程菌包括Hst5基因，其序列见序列6，所述重组工程菌的表达质粒为pMG36e，所述重组工程菌的宿主菌为乳酸菌。

2.根据权利要求1所述的高效表达Hst5的重组工程菌，其特征在于：所述乳酸菌包括乳酸乳球菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、植物乳杆菌。

3.一种如权利要求1所述的高效表达Hst5的重组工程菌的构建方法，其特征在于：构建方法如下：

⑴构建N端引入乳酸菌信号肽的Hst5基因，Hst5基因序列见序列6；

⑵将Hst5基因插入到乳酸菌表达载体的多克隆位点，构建得到Hst5重组质粒，所述重组质粒为pMG36e-Hst5；

⑶将Hst5重组质粒转化至宿主菌，所述宿主菌为乳酸菌，得到Hst5重组乳酸菌。

4.根据权利要求3所述的高效表达Hst5的重组工程菌的构建方法，其特征在于：所述步骤⑴中N端引入乳酸菌信号肽的Hst5基因通过DNA合成或重叠PCR方法获得，在采用重叠PCR方法时，所用引物序列包括：

在引物P3、P4中分别引入SalI和HindIII酶切位点，下划线部分，重叠PCR分为两步：第一步，以P1和P2引物互为模板进行PCR扩增；第二步，以第一步获得的PCR产物为模板，以P3和P4为引物进行PCR扩增得到目的基因。

5.一种如权利要求1所述的高效表达Hst5的重组工程菌作为防腐添加剂的应用。

6.一种如权利要求1所述的高效表达Hst5的重组工程菌作为发酵剂的应用。