[发明专利]旋毛虫与乳腺癌相关抗原基因TS498抗体制备方法无效
| 申请号： | 201210204915.5 | 申请日： | 2012-06-20 |
| 公开（公告）号： | CN102719441A | 公开（公告）日： | 2012-10-10 |
| 发明（设计）人： | 张西臣;李建华;任保彦;宫鹏涛;杨举;张国才;张楠;左绍志;李赫;陈玉江 | 申请（专利权）人： | 吉林大学 |
| 主分类号： | C12N15/12 | 分类号： | C12N15/12;C07K16/18;A61K39/395;A61P35/00 |
| 代理公司： | 吉林长春新纪元专利代理有限责任公司 22100 | 代理人： | 陈宏伟 |
| 地址： | 130000 吉*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 旋毛虫 乳腺癌 相关 抗原 基因 ts498 抗体 制备 方法 | ||
1. 一种旋毛虫与MCF-7乳腺癌细胞相关蛋白基因TS498，其特征在于：
其DNA序列如SEQ No.1所示。
2. 根据权利要求1所述的旋毛虫与MCF-7乳腺癌细胞相关抗原基因TS498蛋白的抗体制备方法，其特征在于：
分别制备旋毛虫和MCF-7乳腺癌细胞的抗血清，然后分别利用间接ELISA方法确定肿瘤细胞抗原与旋毛虫阳性血清、旋毛虫抗原与肿瘤细胞阳性血清间是否存在相关抗原；利用western blotting 方法确定与旋毛虫相关的MCF-7细胞抗原的分子量大小，并分离相关蛋白，制备相关蛋白的抗血清；
然后利用制备的抗血清对旋毛虫cDNA表达文库进行筛选，得到与MCF-7相关的旋毛虫蛋白基因；
克隆并原核表达相关蛋白，纯化复性其原核表达蛋白作为免疫原免疫小鼠，获得相关基因蛋白的抗体；
根据权利要求1所述的旋毛虫与MCF-7乳腺癌细胞相关蛋白制备方法，其特征在于引物序列为：
上游: 5'-CTCGGGAAGCGCGCCATTGTGTTGGT-3',
下游: 5'-ATACGACTCACTATAGGGCGAATTGGC-3'。
3. 根据权利要求1所述的旋毛虫与MCF-7乳腺癌细胞相关蛋白制备方法，其特征在利用含特定酶切位点的特异性引物扩增TS98基因，引物序列为：
上游：5’-TCCGAATTCATGCAGGGCTATCGCAGTCC-3’，
下游：5’- GCACTCGAGTCATCTCTTCTGACCAGCCGG 3’。
4. 根据权利要求1所述的旋毛虫与MCF-7乳腺癌细胞相关抗原基因蛋白在制备治疗乳腺癌药物中的应用。
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