[发明专利]一种籼稻组织培养的方法无效
| 申请号： | 201210199024.5 | 申请日： | 2012-06-14 |
| 公开（公告）号： | CN102715084A | 公开（公告）日： | 2012-10-10 |
| 发明（设计）人： | 付永彩;王超杰;杨亚萍;韩冰;朱颖;李倩倩;孙传清 | 申请（专利权）人： | 中国农业大学 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅;王慧凤 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 籼稻 组织培养 方法 | ||
1.籼稻组织培养方法，包括下述步骤：
1）诱导籼稻愈伤组织；
2）对愈伤组织进行继代培养；
3）将经过继代培养的愈伤组织进行分化培养；
所述分化培养的培养基为基本培养基添加a-萘乙酸、6-BA和20-40g/L山梨醇的固体培养基。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述分化培养的培养基中的a-萘乙酸添加的终浓度为（0.5-1.2）mg/L，优选为1mg/L，所述分化培养的培养基中的6-BA添加的终浓度为（1.8-3.0）mg/L，优选为2mg/L；所述分化培养的培养基的pH值为5.8-6.0，优选为5.8-5.9。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述继代培养的培养基为基本培养基添加2,4-D和甘露醇获得的固体培养基。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述继代培养的培养基中2,4-D添加的终浓度为1.5-2.5mg/L，优选为2mg/L，甘露醇添加的终浓度为35-37g/L，优选为36.43g/L，所述继代培养的培养基pH值为5.8-6，优选为5.8-5.9。
5.根据权利要求1-4中任意一项所述的方法，其特征在于：所述分化培养和继代培养的每1L基本培养基均由（1200-1300）mgKNO3、（590-650）mgNH4NO3、（560-590）mg CaCl2.2H2O、（220-250）mg MgSO4.7H2O、（130-150）mg KH2PO4、（27-28）mg FeSO4.7H2O、（37-38）mgNa2-EDTA.2H2O、（3-3.5）mg H3BO3、（10-11.5）mg MnSO4.4H2O、（5.1-6.0）mg ZnSO4.7H2O、（0.75-0.85）mg KI、（0.23-0.25）mg NaMoO4.2H2O、（0.023-0.075）mgCuSO4.5H2O、（0.025-0.03）mg CoCl2.6H2O、（5-6.5）mg烟酸、（8-10）mg维生素B1、（0.8-1.2）mg维生素B6、（80-100）mg肌醇、（18-22）g麦芽糖、（3-4）g植物凝胶和水组成，用水补足体积；pH值为5.8-6.0；
所述每1L基本培养基优选由（1200、1212或1300）mg KNO3、（590、640或650）mgNH4NO3、（560、588或590）mg CaCl2.2H2O、（220、247或250）mg MgSO4.7H2O、（130、136或150）mg KH2PO4、（27、27.8或28）mg FeSO4.7H2O、（37、37.3或38）mgNa2-EDTA.2H2O、（3、3.1或3.5）mg H3BO3、（10、11.15或11.5）mg MnSO4.4H2O、（5.1、5.76或6.0）mg ZnSO4.7H2O、（0.75、0.83或0.85）mgKI、（0.23、0.24或0.25）mgNaMoO4.2H2O、（0.023、0.025或0.075）mgCuSO4.5H2O、（0.025、0.028或0.03）mgCoCl2.6H2O、（5、6或6.5）mg烟酸、（8、8.5或10）mg维生素B1、（0.8、1或1.2）mg维生素B6、（80、90或100）mg肌醇、（18、20或22）g麦芽糖、（3、3.5或4）g植物凝胶和水组成，用水补足体积；pH值具体为5.8或6.0。
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