[发明专利]6-GGPP合酶、8-倍半萜合酶、截短侧耳素高产菌株及菌株的应用有效
申请号: | 201210198155.1 | 申请日: | 2012-06-15 |
公开(公告)号: | CN102703479A | 公开(公告)日: | 2012-10-03 |
发明(设计)人: | 马景武;赵硕珍;王炜;王莉;李平作;马丽丽 | 申请(专利权)人: | 山东胜利股份有限公司 |
主分类号: | C12N15/54 | 分类号: | C12N15/54;C12N15/60;C12N1/14;C12P15/00;C12R1/645 |
代理公司: | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人: | 李桂存 |
地址: | 250101 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | ggpp 倍半萜 侧耳 高产 菌株 应用 | ||
1.6-GGPP合酶,其特征是:其具有SEQ IDNO:1或SEQ IDNO:2所述的碱基序列。
2.8-倍半萜合酶,其特征是:其具有SEQ IDNO:3或SEQ IDNO:4所述的碱基序列。
3.截短侧耳素高产菌株,其特征是:所述菌株中含有表达6-GGPP合酶的SEQ ID NO:1所述的基因和表达8-倍半萜合酶的SEQ IDNO:3所述的基因;或者含有表达6-GGPP合酶的SEQ IDNO:2所述的基因和表达8-倍半萜合酶的SEQ IDNO:4所述的基因。
4.根据权利要求3所述的截短侧耳素高产菌株,其特征是:所述菌株为斜盖伞(Clitopilus prunulus)TM110518 CGMCC NO.6093或斜盖伞(Clitopilus prunulus)TM110519 CGMCC NO. 6094。
5.一种截短侧耳素的发酵生产方法,其特征是:以权利要求3或4所述的截短侧耳素高产菌株为菌种,经过发酵得截短侧耳素。
6.根据权利要求5所述的发酵生产方法,其特征是,发酵培养的步骤为:将菌种以1%-15%的接种量接入发酵培养基中,在温度20-35℃、pH1-10的条件下,发酵3-20天。
7.根据权利要求5所述的发酵生产方法,其特征是:发酵培养时,湿度为30-60%,溶氧为5-100%,转速为100-1000rpm。
8.根据权利要求5所述的发酵生产方法,其特征是:发酵培养基为:葡萄糖45-55g/L,玉米浆粉15-25 g/L,MgSO4 0.2-0.6 g/L,CaCO3 0.5-2 g/L,豆油3-5 g/L。
9.根据权利要求5所述的发酵生产方法,其特征是:在发酵培养前,先将菌种进行斜面活化和种子培养,过程为:
(1)将菌种接种到斜面培养基上,在20-35℃培养5-10天,对菌种进行活化;
(2)将活化的菌种接种到种子培养基中,20-35℃、100-500 r/min下进行一级种子培养,振摇培养5-10天,得一级种子液,然后以5-15%的接种量将一级种子液在相同的种子培养基、相同条件下进行二级种子培养,培养3-5天,得二级种子液。
10.根据权利要求9所述的发酵生产方法,其特征是:斜面培养基为:土豆180-250 g/L,葡萄糖15-25g/L,琼脂15-25g/L,pH1-10;种子培养基为:葡萄糖45-55 g/L,酵母提取物10-20 g/L,MgSO4 0.3-1.0 g/L,Ca(NO3)20.03-0.1 g/L,KH2PO4 0.5-2 g/L,pH1-10。
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