[发明专利]一种同时测定酒花中α-酸、β-酸和异α-酸的方法

权利要求书

1.一种同时测定酒花中α-酸、β-酸和异α-酸的方法，其特征包括以下步骤：

1）样品制备：取酒花颗粒样品粉末状样品5.0g，置于250mL具塞锥形瓶中，用10-30mL甲醇和70-100mL乙醚萃取，于恒温20℃摇床振荡30min，加入0.1mol/L盐酸溶液30-50mL，再振荡30min，静置30min使其分层；取上层乙醚层5mL，用甲醇定容至50mL，充分均匀，用0.45μm有机滤膜过滤，存于样品瓶中，准备进样；或取酒花浸膏样品0.1g，置于50mL烧杯中，用40mL甲醇溶解，置于超声波水浴10-20min，转移至100mL容量瓶中，用甲醇定容，充分混匀；用0.45μm有机滤膜过滤，存于样品瓶中，准备进样；

2）将步骤1）制备好的样品用反相高效液相色谱分析，分析条件如下：

色谱柱：EC 250/4Nuclesoil 100-5C18；

洗脱条件：流动相：有机相为乙腈；无机相为含有磷酸(85%)0.1%、0.2mM EDTANa₂的水溶液。本发明采用梯度洗脱方法，洗脱程序为：0-30min，0%B-60%B；30-32min，60%B-70%；32-50min，70%B-75%B；50-55min，75%B-60%B；

进样体积10μL，流速1.0mL/min，柱温30℃；

检测波长：异α-酸的检测波长270nm，α-酸和β-酸的检测波长315nm。