[发明专利]红景天注射液的指纹图谱检查方法

权利要求书

1.一种红景天注射液的指纹图谱检查方法，其特征在于包括如下步骤：

（1）建立红景天注射液标准物质指纹图谱；

a、红景天注射液指纹图谱标准物质的制备：提取大株红景天得粉剂；

b、标准物质溶液的制备：

取上述红景天指纹图谱标准物质1支，相当于注射液2ml，加水稀释至10ml，摇匀，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次5ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加注射用水溶解，转移至5ml量瓶中，用注射用水稀释至刻度，0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液，即得；

c、供试品溶液的制备：

取红景天注射液2ml，加水至10ml，摇匀，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次5ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加注射用水溶解，转移至5ml量瓶中，用注射用水稀释至刻度，0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液，即得；

d、色谱条件：

采用菲罗门Phenomenex色谱分析柱，流动相为0.07％磷酸溶液、乙腈－甲醇，体积比1：1；检测波长：278nm；柱温：30℃，进行梯度洗脱； 

e、测定：

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，红景天注射液标准物质指纹图谱与供试品指纹图谱采用相似度软件进行评价，相似度不应低于0.95；

（2）以步骤（1）相同的方法建立待测红景天注射液样品的指纹图谱；

（3）将步骤（2）得到的红景天注射液样品指纹图谱与红景天注射液标准物质指纹图谱进行相似度评价，筛选符合红景天注射液标准指纹图谱要求的样品。

2.按照权利要求1所述的红景天注射液的指纹图谱检查方法，其特征在于

红景天注射液指纹图谱标准物质的制备如下：取大株红景天1670g，加水煎煮三次，每次加水6倍，煎煮2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.15～1.20的清膏，温度50℃；加乙醇使含醇量达70%，搅匀，冷藏 24小时，温度5～10℃，滤过，沉淀以5～10℃的少量70%乙醇洗涤一次，滤过，合并滤液，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.15～1.20的清膏，温度50℃；再加乙醇使含醇量达85%，搅匀，冷藏24小时，温度5～10℃，滤过，沉淀以5～10℃的少量85%乙醇洗涤一次，滤过，合并滤液，调pH值至8.0， 冷藏12小时，温度5～10℃，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度为1.20～1.30的清膏，温度50℃，加入注射用水1000ml，冷藏12小时，温度5～10℃，滤过，滤液调pH值至7.0，加热煮沸30分钟，冷藏72小时，温度5～10℃，滤过，滤液以截留分子量为10000的超滤柱超滤，超滤液加注射液用水定容至1000ml，超滤液加入100g甘露醇，边搅拌边加热，煮沸30min，降至室温，用0.22μm微孔滤膜过滤，灌封至2ml西林瓶中，每瓶装2ml，装好胶塞，放入冻干机中，按规定冻干曲线操做，冷冻结束后，取出压盖，即得。

3.按照权利要求1所述的红景天注射液的指纹图谱检查方法，其特征在于红景天注射液标准物质指纹图谱应符合下列要求：

供试品指纹图谱与标准指纹图谱相似；标准物质指纹图谱应有18个共有峰；相对保留时间：0.15±10%(1)， 0.20±10%(2)，0.97±10%(3)，1.18±10%(4)， 1.31±10%(5)， 1.42±10%(6)，1.51±10%(7)， 1.61±10%(8)， 1.85±10%(9)，2.01±10%(10)，2.12±10%(11)，2.33±10%(12)，2.44±10%(13)，2.62±10%(14)，2.82±10% (15)，2.91±10％（16），2.99±10％（17），3.07±10％（18）；非共有峰面积之和不得过总峰面积的15%。

4.按照权利要求1所述的红景天注射液的指纹图谱检查方法，其特征在于以多批次大株红景天注射液标准物质指纹图谱生成的综合对照指纹图谱为参照，计算多批次注射液指纹图谱与标准物质指纹图谱的相似度。

5.按照权利要求1所述的红景天注射液的指纹图谱检查方法，其特征在于以三批大株红景天注射液标准物质指纹图谱生成的综合对照指纹图谱为参照，计算十批注射液指纹图谱与标准物质指纹图谱的相似度；十批注射液与标准物质指纹图谱的相似度均大于0.98。