[发明专利]三聚氰胺单试剂荧光偏振免疫检测方法无效
| 申请号： | 201210194135.7 | 申请日： | 2012-06-13 |
| 公开（公告）号： | CN102721803A | 公开（公告）日： | 2012-10-10 |
| 发明（设计）人： | 孙远明;雷红涛;王强;王弘;沈玉栋;杨金易;徐振林;吕书为;唐秋实 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | G01N33/533 | 分类号： | G01N33/533 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 林丽明;任重 |
| 地址： | 510642 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 三聚 氰胺单 试剂 荧光 偏振 免疫 检测 方法 | ||
1.一种三聚氰胺单试剂荧光偏振免疫检测方法，其特征在于是将待检样品和单试剂免疫复合物混合置换反应，测量荧光偏振值，根据标准曲线定量计算出待检样品中三聚氰胺的浓度；
所述单试剂免疫复合物是将三聚氰胺半抗原与异硫氰酸荧光素乙二胺衍生物偶联合成三聚氰胺荧光示踪物活性产物；将三聚氰胺荧光示踪物活性产物和三聚氰胺抗体混合反应制备得到；
所述三聚氰胺半抗原，具有式（Ⅰ）所示结构：
（Ⅰ）；
所述异硫氰酸荧光素乙二胺衍生物具有式（Ⅱ）所示结构：
（Ⅱ）；
所述三聚氰胺荧光示踪物活性产物具有式（Ⅲ）所示结构：
（Ⅲ）。
2.根据权利要求1所述三聚氰胺单试剂荧光偏振免疫检测方法，其特征在于所述三聚氰胺荧光示踪物活性产物与三聚氰胺抗体的体积比为1:1。
3.根据权利要求1所述三聚氰胺单试剂荧光偏振免疫检测方法，其特征在于所述三聚氰胺荧光示踪物活性产物与三聚氰胺抗体混合反应时间为12分钟。
4.一种三聚氰胺单试剂荧光偏振免疫检测方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）标绘制准曲线：分别向系列浓度的三聚氰胺标准物中加入权利要求1所述单试剂免疫复合物，置换反应，测量荧光偏振值的变化建立标准曲线；
（2）检测样品，计算得到结果：将待检样品与权利要求1所述单试剂免疫复合物混合，置换反应，测量荧光偏振值，根据标准曲线定量计算出待检样品中三聚氰胺的浓度。
5.根据权利要求4所述三聚氰胺单试剂荧光偏振免疫检测方法，其特征在于步骤（1）所述置换反应是在室温下反应15min。
6.根据权利要求4所述三聚氰胺单试剂荧光偏振免疫检测方法，其特征在于步骤（2）所述置换反应是在室温下反应15min。
7.根据权利要求4所述三聚氰胺单试剂荧光偏振免疫检测方法，其特征在于步骤（1）所述三聚氰胺标准物和单试剂免疫复合物的体积比为1：9。
8.根据权利要求4所述三聚氰胺单试剂荧光偏振免疫检测方法，其特征在于步骤（2）所述待检样品和单试剂免疫复合物的体积比为1：9。
9.权利要求1～8任一项权利要求所述的检测方法在奶粉或牛奶中三聚氰胺检测方面的应用。
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