[发明专利]病毒样颗粒的制备方法及其使用的重组杆状病毒在审
| 申请号： | 201210194037.3 | 申请日： | 2012-06-13 |
| 公开（公告）号： | CN103320394A | 公开（公告）日： | 2013-09-25 |
| 发明（设计）人： | 胡育诚;林事晔 | 申请（专利权）人： | 胡育诚 |
| 主分类号： | C12N7/01 | 分类号： | C12N7/01;C12N7/04;A61K39/125;A61P31/14;C12R1/93 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人： | 陈静 |
| 地址： | 中国台湾新*** | 国省代码： | 中国台湾;71 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 病毒 颗粒 制备 方法 及其 使用 重组 杆状病毒 | ||
1.一种重组杆状病毒，包括：
第一核苷酸序列，其用以翻译成微小核糖核酸病毒的病毒壳蛋白；
第一启动子，位于该第一核苷酸序列的上游，其中该第一启动子为该重组杆状病毒在昆虫细胞中表达的强势启动子；
第二核苷酸序列，其用以翻译成该微小核糖核酸病毒的水解蛋白，该水解蛋白用以水解该病毒壳蛋白；以及
第二启动子，位于该第二核苷酸序列的上游，其中
该第二启动子为该重组杆状病毒在该昆虫细胞中表达的弱势启动子；以及
该重组杆状病毒的几丁质酶A(ChiA)基因与v-组织蛋白酶(v-cath)基因为功能损坏。
2.如权利要求1所述的重组杆状病毒，其中该第一启动子包括杆状病毒多角体蛋白启动子或P10启动子。
3.如权利要求1所述的重组杆状病毒，其中该第二启动子包括杆状病毒立即早期启动子、巨细胞即早基因病毒启动子或果蝇hsp70启动子。
4.如权利要求1所述的重组杆状病毒，其中该第二启动子包括片段的强势启动子。
5.如权利要求1所述的重组杆状病毒，其中该昆虫细胞包含Sf-9细胞株或High Five细胞株。
6.如权利要求1所述的重组杆状病毒，其中该微小核糖核酸病毒包括肠病毒。
7.如权利要求6所述的重组杆状病毒，其中该肠病毒包括肠病毒68-71型或柯萨奇病毒B群病毒。
8.一种病毒样颗粒的制备方法，其包括：
提供重组杆状病毒，其包括：
第一核苷酸序列，其用以翻译成微小核糖核酸病毒的病毒壳蛋白；
第一启动子，位于该第一核苷酸序列的上游，其中该第一启动子为该重组杆状病毒在昆虫细胞中表达的强势启动子；
第二核苷酸序列，其用以翻译成该微小核糖核酸病毒的水解蛋白，该水解蛋白用以水解该病毒壳蛋白；以及
第二启动子，位于该第二核苷酸序列的上游，其中
该第二启动子为该重组杆状病毒在该昆虫细胞中表达的弱势启动子；以及
该重组杆状病毒的几丁质酶A(ChiA)基因与v-组织蛋白酶(v-cath)基因为功能损坏；以及
以该重组杆状病毒感染该昆虫细胞，以使该水解蛋白水解该病毒壳蛋白，并产生该微小核糖核酸病毒的病毒样颗粒。
9.如权利要求8所述的病毒样颗粒的制备方法，其中该第一启动子包括杆状病毒多角体蛋白启动子或P10启动子。
10.如权利要求8所述的病毒样颗粒的制备方法，其中该第二启动子包括杆状病毒立即早期启动子、巨细胞病毒即早基因启动子或果蝇hsp70启动子。
11.如权利要求8所述的病毒样颗粒的制备方法，其中该第二启动子包括片段的强势启动子。
12.如权利要求8所述的病毒样颗粒的制备方法，其中该昆虫细胞包含Sf-9细胞株或High Five细胞株。
13.如权利要求8所述的病毒样颗粒的制备方法，其中该微小核糖核酸病毒包括肠病毒。
14.如权利要求13所述的病毒样颗粒的制备方法，其中该肠病毒包括肠病毒68-71型或柯萨奇病毒B群病毒。
15.如权利要求8所述的病毒样颗粒的制备方法，其中该病毒样颗粒用以制备疫苗。
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